SDS蛋白胶DIY指南
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佛山市顺德区瑾毅新材料有限公司位于顺德区杏坛镇,主营防火涂层胶、水性胶粘剂等产品,专注金属制品与涂料制造领域,依托技术研发与直供优势,为建筑、家电等行业提供专业解决方案。成立于2022年,凭借合规经营与高效服务树立行业口碑。
导读:
本文手把手教你制作SDS蛋白胶的完整流程,从原料准备到凝胶凝固,详解关键步骤与实用技巧,助你轻松掌握实验室必备技能。
一、材料准备与配液
就像烘焙需要称量面粉,制作蛋白胶前需精确准备:
- 丙烯酰胺溶液:30%丙烯酰胺与0.8%甲叉双丙烯酰胺混合,避光保存
- 缓冲液:1.5M Tris-HCl(pH8.8)和0.5M Tris-HCl(pH6.8)两种
- 催化剂:10%过硫酸铵(现配现用)与TEMED
- 其他:SDS、蒸馏水、异丙醇及制胶模具
二、分离胶灌注技巧
这是决定电泳效果的关键层,操作时注意:
- 混合比例:按目标浓度(如12%)混合丙烯酰胺溶液、缓冲液、SDS和蒸馏水
- 触发凝固:加入过硫酸铵和TEMED后需在1分钟内完成灌胶
- 除气泡:缓慢注入模具至70%高度,轻轻覆盖异丙醇压平界面
- 等待凝固:室温静置20-30分钟,出现明显折光界面即完成
三、浓缩胶制作要点
最后这层让蛋白样品乖乖排队:
- 倒掉异丙醇:凝固后倾斜模具倒出液体,滤纸吸干残留
- 配制浓缩胶:5%丙烯酰胺混合0.5M Tris-HCl(pH6.8)缓冲液
- 插梳子诀窍:灌胶后快速插入齿梳,避免产生气泡或胶面不平
- 完全凝固:再等待15分钟,拔出梳子时可见清晰加样孔
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