寻源宝典SDS-PAGE预制胶DIY指南
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
翌圣生物科技（上海）股份有限公司成立于2014年，总部位于上海市浦东新区天雄路，专注生命科学领域研发与生产。核心产品涵盖qPCR、NGS、分子克隆、抗体及蛋白纯化等全系列试剂，覆盖生命科学研究、诊断检测及生物医药全产业链。依托原研技术平台，为科研机构与医疗机构提供逾20类高品质试剂及解决方案，技术领先，供应稳定。
介绍：
本文详解实验室常用SDS-PAGE预制胶的配方比例与制作流程，从原料准备到凝胶成型的关键步骤，附带常见问题解决方案，助你轻松掌握电泳核心技术。
一、配方里的科学密码
SDS-PAGE胶就像蛋白质的跑道，分离胶（12%浓度）需要30%丙烯酰胺混合液4ml、1.5M Tris-HCl（pH8.8）2.5ml、10%SDS 0.1ml，加上0.1ml 10%过硫酸铵和0.004ml TEMED触发聚合。浓缩胶（5%浓度）则用1.3ml丙烯酰胺混合液、1ml 0.5M Tris-HCl（pH6.8）和相同促凝剂，记住所有液体需冰浴延缓凝固。
二、实验室手作七步曲
模具组装：玻璃板夹紧后底部封蜡，形成注胶空间
分离胶灌注：沿板壁缓慢注入至距顶端2cm处
水封层：立即覆盖1cm异丙醇排除气泡
浓缩胶时机：待分离胶凝固后倒掉异丙醇
梳齿定位：插入样品梳时注意避免产生气泡
凝固检测：室温静置45分钟可见明显折光界面
脱模技巧：用刀片沿边缘缓慢撬开玻璃板
三、成败关键细节
胶体出现波纹可能是丙烯酰胺储存过久，建议现配现用；若出现脱胶现象，检查TEMED是否失效（新开瓶试剂效果较好）。跑样时条带弯曲？大概率是凝胶聚合不均匀，灌胶后轻敲模具两侧可消除气泡。保存预制胶需用湿润滤纸包裹后密封，4℃环境下能维持3天使用效果。
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