制胶配比全攻略

一、制胶配比的核心原理

制胶就像做蛋糕，原料配比决定成败。关键看两点：

1. 胶体浓度：通常1.5%-2%的琼脂糖适合DNA电泳，浓度越高孔径越小

2. 缓冲液选择：TAE缓冲液分辨率高，TBE缓冲液跑小片段更清晰

3. 添加剂妙用：EB替代品更安全，甘油能减缓电泳速度提高分辨率

二、三种经典配方实测

实验室最常用的三种黄金配比：

• 常规DNA检测胶：1g琼脂糖+100ml TAE，微波加热90秒

• 小片段分离胶：3%琼脂糖+TBE，需延长凝固时间至40分钟

• 蛋白胶特别版：丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺29:1，注意避光操作

三、避坑指南

这些血泪教训帮你少走弯路：

1. 气泡杀手：倒胶前静置5分钟，60℃水浴消泡效果更佳

2. 凝固异常：室温低于20℃时，可加1/10体积的热缓冲液助凝

3. 胶板开裂：厚度控制在5-8mm最佳，太薄易碎太厚难凝固

4. 电泳模糊：检查缓冲液是否重复使用超过3次，新鲜配制效果更好

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