PEI转染试剂保存指南

一、PEI试剂能冷冻保存吗？

实验室里总有人把PEI试剂随手塞进-20℃冰箱，这其实是个常见误区。线性PEI在冷冻后会出现以下问题：

• 解冻后易形成不可逆沉淀

• 转染效率可能下降30%-50%

• 反复冻融会加速试剂降解

理想保存方式是4℃避光存放，开封后建议3个月内用完。若必须分装冷冻，应使用无菌离心管，避免反复冻融超过2次。

二、胶状PEI的转染潜力

遇到瓶底出现果冻状PEI别急着扔掉，这种胶状物可能是浓度过高导致的。通过以下处理仍可用于转染：

1. 水浴加热：37℃震荡溶解30分钟

2. 过滤除菌：0.22μm滤膜过滤后检测pH值

3. 效能测试：先用报告基因验证转染效率

注意胶状PEI可能需要调整DNA比例，建议从常规用量的1.5倍开始梯度测试。

三、实验优化小贴士

想让PEI发挥理想效果，这些细节很关键：

• 血清影响：转染前2小时换成无血清培养基

• 细胞密度：70%-80%融合度时效果较好

• 复合物配制：建议用Opti-MEM等低盐溶液稀释

• 时间控制：复合物形成后30分钟内加入细胞

特殊细胞系可尝试在转染后6小时更换新鲜培养基，能减轻毒性同时保持效率。

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