寻源宝典细胞传代密度过高与过低如何解决
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上海博湖生物科技有限公司
上海博湖生物,2013年成立于上海闵行,专营elisa试剂盒等生物试剂,专业权威,技术经验丰富,服务生物科技领域。
介绍:
传代密度过高解决方案: 尽量避免融合度过高,镜下观察融合度约达到80%即可传代分盘。 细胞融合度:在细胞培养中指的是细胞在培养表面(培养皿/瓶)所占的比例。 传代密度过低解决方案: 细胞传代时,要进行准确的细胞计数,确保铺盘的密度。
细胞传代问题解决方案:
1、传代密度过高
一旦细胞养太久至融合度过高(>90%)才传代,容易使细胞产生老化现象,甚至是堆叠,再消化细胞时不易吹打成单颗细胞,即便再重新铺盘传代,细胞也无法回到原本的特性了。(如:单层细胞,没长满就发生堆叠现象)。
解决方案:
尽量避免融合度过高,镜下观察融合度约达到80%即可传代分盘。
细胞融合度:在细胞培养中指的是细胞在培养表面(培养皿/瓶)所占的比例。
2、传代密度过低
哺乳动物贴壁培养细胞,若细胞培养到80-90%密度需要开始传代,在传代接种细胞密度过低,细胞间距离太远,就无法在细胞间产生黏附及通信作用,帮助信号传导并活化细胞;总体细胞量不足,分泌的生长因子浓度会不足以产生利于生长的微环境,以上皆会造成增殖速度迟缓或细胞死亡。
解决方案:
细胞传代时,要进行准确的细胞计数,确保铺盘的密度。

