小型发酵罐设备的标准化操作指南

一、设备清洁与灭菌

1、拆卸罐体及附属部件，使用专用清洗剂彻底清除残留物，重点清洁搅拌桨、通气管道等易积垢部位。

2、采用121℃高压蒸汽灭菌20分钟，或使用75%乙醇溶液进行表面消毒，确保无菌状态。

二、培养基预处理

1、根据菌种特性配制培养基，使用pH计精确调节至6.8±0.2范围。

2、将培养基注入发酵罐后，以1.5℃/min速率升温至设定温度，避免局部过热。

三、菌种接种技术规范

1、在超净工作台内完成菌种扩培，接种量控制在培养基体积的5%-10%。

2、采用火焰接种法或无菌注射方式，确保接种过程无污染。

四、发酵过程动态调控

1、维持溶氧量在30%-60%饱和度，通过调节搅拌转速（200-800rpm）和通气量（0.5-1.5vvm）实现。

2、每2小时记录温度、pH、OD值等参数，偏差超过5%时立即调整。

五、发酵终止与后处理

1、当菌体密度达到稳定期或产物浓度不再增加时终止发酵。

2、取样进行HPLC分析后，按生物安全标准处理废液，设备需进行CIP清洗程序。

通过上述标准化操作流程，可显著提高小型发酵罐的工作效率，同时保证发酵产物的品质稳定性。操作人员应严格遵循各环节技术规范，并做好过程记录以备质量追溯。

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