hilic色谱柱注意事项

一、流动相选择与平衡技巧

hilic色谱柱就像挑剔的美食家，对流动相有严格要求：

• 乙腈比例：建议初始比例不低于70%，水相过高会导致固定相塌陷

• 缓冲盐选择：甲酸铵/乙酸铵优于磷酸盐，浓度控制在5-20mM

• 平衡时间：新柱需2小时平衡，每次梯度后需30分钟再平衡

二、样品处理与进样要点

让色谱柱远离"消化不良"的秘诀：

1. 样品溶剂：溶解溶剂强度≤初始流动相，避免溶剂效应峰变形

2. 进样量：50mm内径柱不超过5μL，过量会导致峰展宽

3. pH控制：保持样品pH在2-8之间，硅胶基质在极端pH下会溶解

三、维护与存储的黄金法则

延长色谱柱寿命的三重防护：

• 冲洗程序：每天用90%乙腈冲洗30分钟，防止盐析出

• 污染处理：蛋白质污染用0.1%TFA反向冲洗，脂质污染用异丙醇冲洗

• 存储条件：长期存放需用95%乙腈充满，避免气泡形成

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