TBST缓冲液配方表
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北京谱析科技有限公司
北京谱析科技有限公司,2023年成立于北京市,主营分析标准品、质控样品等,专业权威,经验丰富。
介绍:
本文详细介绍TBST缓冲液的配方比例、配制步骤及使用注意事项,帮助实验人员准确制备适用于Western blot等实验的理想缓冲液。
一、TBST缓冲液基础配方
TBST缓冲液是分子生物学实验中常用的洗涤缓冲液,其核心配方就像调制一杯精准的鸡尾酒:
Tris-HCl(pH7.6):提供稳定pH环境,通常使用10mM浓度
NaCl:维持离子强度,经典配比为150mM
Tween 20:作为表面活性剂,添加量通常为0.05%-0.1%
二、分步配制指南
配制过程如同化学家的烹饪课,关键步骤包括:
溶解Tris:先用800mL去离子水溶解1.21g Tris碱
调节pH:用浓盐酸将溶液调至7.6,注意逐滴加入
加盐调味:加入8.77g NaCl,搅拌至完全溶解
最后点睛:加入0.5mL Tween 20,定容至1L后过滤
三、实用技巧与注意事项
这些经验之谈能让你的缓冲液更可靠:
温度敏感:4℃保存时Tween 20可能析出,使用前需回温混匀
pH校准:不同温度下pH值会漂移,建议在25℃测量
替代方案:无Tween 20时可用Triton X-100替代,但需调整浓度
常见误区:并非浓度越高越好,过量Tween 20会导致蛋白脱落
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