磁珠保存管接菌方法

一、准备工作要做好

在开始接菌前，确保所有工具和材料都已准备齐全并消毒：

• 磁珠保存管（提前预冷至-20℃）

• 无菌接种环或移液器

• 酒精灯及75%酒精

• 待保存菌液（处于对数生长期）

• 生物安全柜（提前紫外消毒30分钟）

二、具体操作分步走

1. 菌液处理：将培养好的菌液离心（3000rpm,5分钟），弃上清后用无菌PBS重悬至麦氏浊度0.5

2. 磁珠活化：快速取出预冷磁珠管，室温静置2分钟解冻表面冷凝水

3. 接菌操作：在火焰旁用移液器吸取100μl菌悬液，垂直滴加至磁珠表面（管壁倾斜45°防飞溅）

4. 混合吸附：立即涡旋振荡10秒，使磁珠均匀吸附菌体

三、常见问题巧解决

• 磁珠结块：解冻不彻底导致，可延长室温放置时间至5分钟

• 接菌量不足：检查菌液浓度，确保OD值在0.4-0.6区间

• 污染风险：操作全程在安全柜内完成，每步骤酒精擦拭台面

• 保存效果验证：接菌后取10μl涂板培养，确认活菌数≥10^8CFU/ml

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