寻源宝典固相萃取操作流程
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长沙华学生物科技有限公司
长沙华学生物科技有限公司位于浏阳市关口街道,专注于试剂盒、色谱柱、标准溶液等生物试剂及实验室设备的研发与销售,深耕生物技术领域。自2017年成立以来,凭借专业的技术团队和严格的质量把控,为医疗、科研机构提供优质产品与服务,行业口碑卓越。
介绍:
本文详细解析固相萃取(SPE)的规范操作流程,从柱活化到目标物洗脱,分步骤拆解常见误区与优化技巧,帮助实验人员提升样品前处理效率。
一、SPE柱的活化与平衡
固相萃取就像给样品做‘SPA’,第一步要让萃取柱进入理想状态:
活化溶剂:非极性填料用甲醇,离子交换柱加水
润洗体积:通常3-5倍柱床体积,观察到填料均匀湿润
平衡技巧:保留最后1mm液面防止柱床干裂
二、上样与杂质冲洗
样品与萃取柱的‘相亲大会’需注意:
流速控制:手动操作保持1-2滴/秒,避免通道效应
pH调节:酸性化合物调pH低于pKa值2个单位
干扰物去除:用5%甲醇水溶液冲洗可去除大部分极性杂质
三、洗脱与柱再生
目标物的‘毕业典礼’决定回收率:
洗脱溶剂:极性比样品强10-20%效果较好
收集策略:分两段收集(前0.5ml+后1ml)防遗漏
柱子保养:反相柱用甲醇保存,强阴离子柱需0.1M盐酸冲洗
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