PCR凝胶制备全攻略
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上海木辰生物科技有限公司，2020年成立于上海市，主营吸头、PCR管等，专业权威，经验丰富。
导读：
本文系统介绍PCR凝胶的制备方法、体积计算与规格选择技巧，从胶液配比到电泳参数设置，助你轻松获得理想电泳结果。
一、凝胶配比黄金公式
PCR凝胶就像分子生物学的'跑道'，其核心是琼脂糖与缓冲液的配比：
- 1%常规胶：1g琼脂糖+100mL TAE缓冲液（适合100-1000bp片段）
- 2%高分辨胶：2g琼脂糖+100mL TAE缓冲液（适合50-500bp小片段）
- 体积计算公式：胶床长(cm)×宽(cm)×厚(cm)×0.01=琼脂糖克数
二、电泳槽匹配智慧
不同规格电泳槽需要个性化解法：
- 迷你胶系统（7cm胶床）：通常制备25-30mL胶液，电压设置80-100V
- 标准胶系统（14cm胶床）：建议50-70mL胶液，电压100-120V
- 大胶系统（20cm胶床）：需100-150mL胶液，电压120-150V
三、实操避坑指南
这些细节决定电泳成败：
- 微波加热法：加热至完全透明后静置2分钟，避免沸腾暴沸
- 染色剂添加：每100mL胶液加5μL核酸染料，搅拌避免气泡
- 倒胶技巧：60℃左右倒胶，梳子插入深度为胶厚1/3
- 电泳时间：以染料先进迁移至胶长3/4为终点
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