制胶加溴酚蓝
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导读：
本文澄清琼脂糖凝胶电泳制胶环节的常见误区，解析溴酚蓝的实际添加阶段和作用原理，并分享染料选择的实用技巧。
一、制胶环节不加溴酚蓝
实验室新人常误以为制胶时就该加溴酚蓝，其实这是个美丽的误会。溴酚蓝作为追踪染料，是在凝胶凝固后与DNA样品混合加入上样缓冲液，而非直接掺入未凝固的琼脂糖溶液。制胶时只需琼脂糖粉末与TAE/TBE缓冲液，60℃左右溶解后倒入模具插梳子即可。
二、溴酚蓝的三大使命
这个小分子在电泳中身兼数职：
- 泳动进度条：在1%琼脂糖凝胶中约与300bp DNA片段同步迁移
- pH指示器：溶液偏酸时变黄，偏碱时呈蓝紫色
- 电场检测员：泳动方向异常提示缓冲液配制可能有误
三、染料选择冷知识
不同实验需求可尝试替代方案：
- 快速电泳可用二甲苯青FF（迁移率更高）
- 核酸回收实验推荐SYBR Safe等无干扰染料
- 蛋白电泳则常用考马斯亮蓝
记住：所有染料都应先配制成6×上样缓冲液，使用时按比例与样品混合。
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