蛋白电泳制胶指南
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东莞市虎门正越五金加工厂，2012年成立于广东省东莞市，主营彩色电泳、黑色电泳等，专业权威，经验丰富。
导读：
本文详细解析蛋白质电泳制胶的关键步骤，从试剂准备到灌胶技巧，再到常见问题排查，帮助实验人员轻松掌握制胶要领，提升电泳分离效果。
一、试剂准备与配比
就像烘焙需要精确称量，制胶前的准备工作决定成败。先确认所需试剂：丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、Tris缓冲液、SDS、TEMED和过硫酸铵。分离胶和浓缩胶的配方不同，常见分离胶浓度为8%-15%，浓缩胶通常为5%。记住：
- 丙烯酰胺有毒，操作需戴手套
- TEMED需现用现取，防止氧化失效
- 过硫酸铵溶液建议分装冷冻保存
二、灌胶操作技巧
灌胶如同制作果冻，既要快又要稳。先灌分离胶，留出浓缩胶空间，异丙醇压平液面。待分离胶凝固后倒掉异丙醇，再灌浓缩胶并插入梳子。关键细节：
- 除气泡：轻轻敲打玻璃板侧面赶走气泡
- 凝固判断：分离胶凝固约30分钟，界面出现折光线
- 梳子插入：保持垂直，避免产生锯齿状上样孔
三、问题排查与优化
遇到不理想的胶？别急，常见问题有解决方案：
- 胶体收缩：可能是TEMED或APS失效，检查试剂新鲜度
- 条带弯曲：检查玻璃板是否清洁，灌胶是否均匀
- 孔洞变形：梳子拔出时保持垂直，可先用去离子水润湿
- 电泳速度异常：确认缓冲液pH是否正确（通常8.3-8.8）
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