Sephadex G25预装柱使用指南

一、Sephadex G25预装柱基础操作

Sephadex G25预装柱是生物实验室中常用的脱盐和缓冲液交换工具，操作简单但需注意细节：

1. 平衡柱体：用3-5倍柱体积的缓冲液冲洗，流速控制在1ml/min以内

2. 上样准备：样品体积不超过柱体积的30%，粘度高时需稀释或离心

3. 收集技巧：从样品完全进入柱床开始计时，前1/3柱体积为无效流出液

二、GE与NAP-5型号差异处理

不同厂家预装柱各有特点：

• GE标准柱：适合1-5ml样品处理，建议垂直固定使用

• NAP-5柱：专为小体积（<0.5ml）设计，可配合微量离心机操作

• 通用原则：所有型号都需避免干燥，使用后立即用20%乙醇保存

三、实战问题排雷指南

遇到这些情况别慌张：

1. 流速异常：检查柱头是否堵塞，必要时用缓冲液反向冲洗

2. 分离效果差：可能是样品过载或柱体未充分平衡

3. 气泡处理：静置15分钟让气泡上浮，轻微敲击柱体辅助排气

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