核酸染料何时加
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瑞康思迈（北京）生物科技有限公司成立于2011年，总部位于北京市东城区，专注研发荧光染料、核酸染料、花菁染料等高端生命科学试剂，产品包括GelRed、PicoGreen等明星产品。公司以自主研发为核心，提供高精度荧光检测解决方案，服务于分子诊断、基因测序等前沿领域，凭借卓越品质和定制化服务持续赋能科研创新。
导读：
本文解答核酸染料和指示剂的加入时机，分析不同实验阶段添加的优缺点，并提供操作建议，帮助实验人员优化流程避免干扰结果。
一、电泳前添加的常规操作
多数核酸染料（如EB替代品）需要在制胶时加入，与琼脂糖凝胶溶液充分混匀后凝固。此时加入能确保染料均匀分布，电泳时核酸条带显色同步。常见比例为每100mL凝胶加5μL染料，过量可能导致背景过深。
二、特殊染料的灵活用法
某些新型核酸染料支持电泳后染色：
- 跑胶完成：将凝胶浸入0.5倍浓度染料溶液
- 避光振荡：室温20分钟或4℃过夜
- 清水脱色：背景更干净，灵敏度提升10倍
此法特别适合需要后续切胶回收的实验。
三、指示剂的加入玄机
Loading buffer中的指示剂（如溴酚蓝）必须与样品预混：
- 定量参照：通过指示剂迁移距离判断电泳进度
- 上样辅助：增加样品密度使其沉入加样孔底部
- pH指示：颜色变化提示缓冲系统是否异常
注意：含染料的buffer需避光保存，避免降解。
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