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手把手教你配1%核酸电泳胶

北京六一生物科技有限公司
法人:朱军通过真实性核验

北京六一生物科技有限公司,2014年成立于北京市,主营混匀仪、制胶器等,产品多样,权威可靠。

导读:

本文详细讲解1%核酸电泳胶的配置方法,包括材料准备、制作步骤和注意事项,帮助科研新手轻松掌握实验技巧,提升实验成功率。

一、材料准备:实验室里的“食材清单”

配置1%核酸电泳胶就像做饭,先得备齐“食材”:

  • 琼脂糖:这是“面粉”,用量需精准——每100ml缓冲液加1g琼脂糖,才能做出1%浓度的胶。
  • 电泳缓冲液:常用1×TAE或1×TBE,相当于“水”,需提前配好并冷却至室温。
  • 染色剂:如GoldView,相当于“食用色素”,能让DNA条带在紫外灯下清晰可见。
  • 模具:包括胶槽、梳子,相当于“烤盘和模具”,用来固定胶的形状。

二、操作步骤:跟着“食谱”一步步来

  1. 称量琼脂糖:用电子天平称取1g琼脂糖,倒入锥形瓶中。
  2. 溶解琼脂糖:加入100ml缓冲液,微波加热或水浴加热至完全溶解,期间可轻轻摇晃锥形瓶帮助溶解。
  3. 冷却胶液:待胶液冷却至60℃左右(手摸不烫),加入5μl染色剂,轻轻混匀。
  4. 灌胶:将胶液倒入胶槽,插入梳子,注意避免产生气泡。
  5. 等待凝固:室温放置30-40分钟,待胶完全凝固后,小心拔出梳子。

三、注意事项:避免“翻车”的关键点

  • 浓度控制:琼脂糖浓度影响分离效果,1%适合分离100bp-10kb的DNA片段,浓度过高或过低都会影响分辨率。
  • 加热均匀:加热时需确保琼脂糖完全溶解,否则胶中会有颗粒,影响电泳效果。
  • 避免气泡:灌胶时若产生气泡,可用枪头轻轻挑破,否则会影响DNA条带的迁移。
  • 染色剂用量:染色剂过多会抑制DNA迁移,过少则条带不清晰,需按比例添加。
  • 胶的保存:若需保存,可用保鲜膜包裹,4℃放置不超过1周,否则胶会变脆。

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法人:朱军通过真实性核验

北京六一生物科技有限公司,2014年成立于北京市,主营混匀仪、制胶器等,产品多样,权威可靠。

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