电泳胶配比指南
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北京六一生物科技有限公司,2014年成立于北京市,主营混匀仪、制胶器等,产品多样,权威可靠。
导读:
本文解析电泳实验中浓缩胶与分离胶的配比原则,重点说明12%浓缩胶的适用场景及配置要点,帮助实验者优化电泳条件。
一、浓缩胶与分离胶的角色分工
电泳胶就像蛋白质的『跑步赛道』,浓缩胶是起跑区(通常4-6%),负责将样本压缩成一条细线;分离胶是主赛道(8-15%),根据分子量大小分离蛋白质。12%浓缩胶属于高浓度配置,适合小分子蛋白(<20kDa)的分离,能产生更清晰的条带。
二、12%浓缩胶的黄金配比
配制100ml 12%浓缩胶需要:
- 丙烯酰胺混合液:12ml 40%丙烯酰胺溶液
- 缓冲液:7.5ml Tris-HCl(pH6.8)
- 催化剂:100μl TEMED + 500μl 10%过硫酸铵
- 补水定容:加去离子水至100ml
注意:丙烯酰胺有神经毒性,操作需戴手套!
三、灵活调整的实用技巧
- 分子量适配:大蛋白(>100kDa)建议用5%浓缩胶+8%分离胶组合
- 特殊需求:双向电泳可尝试4%浓缩胶+梯度分离胶(8-15%)
- 异常处理:若出现条带微笑现象,可降低浓缩胶浓度至8%
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