WB转膜全攻略

一、转膜方法选择

Western Blot转膜主要有湿转和半干转两种方式：

• 湿转法：适合大分子量蛋白（>100kDa），需在缓冲液中完全浸没，转移时间较长（60-90分钟）但效果稳定

• 半干转法：适合小分子量蛋白（<100kDa），直接夹在滤纸间转移，速度快（15-30分钟）但需注意温度控制

二、关键操作步骤

1. 凝胶平衡：电泳后凝胶需在转膜缓冲液中平衡10分钟，防止变形

2. 三明治组装：按顺序放置海绵垫-滤纸-凝胶-膜-滤纸-海绵垫，避免气泡

3. 缓冲液配制：甲醇浓度通常为10%-20%，过高会使膜变脆

三、常见问题解决

• 转膜不彻底：检查电流是否稳定，大分子蛋白可延长转膜时间

• 背景过高：降低抗体浓度或增加封闭时间

• 膜上出现白点：确保三明治各层充分接触，可用玻璃棒赶走气泡

各位老板想要了解更多相关产品，不妨来爱采购试试吧～爱采购信息全面，能够满足你的大量需求！