寻源宝典SDS-PAGE染色液配方
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北京兴华越洋生物科技有限公司
北京兴华越洋生物科技有限公司,2013年成立于北京市,主营生化试剂等,专业权威,经验丰富。
介绍:
本文详细介绍SDS-PAGE染色液的常见配方及配制方法,包括考马斯亮蓝染色液和银染液的成分比例,帮助实验人员快速掌握染色技术。
一、考马斯亮蓝染色液配方
考马斯亮蓝染色液是SDS-PAGE最常用的染色方法之一,其配方简单且效果稳定。主要成分包括:
考马斯亮蓝R-250:0.25g
甲醇:450ml
冰醋酸:100ml
蒸馏水:450ml
配制时先将染料溶于甲醇,再加入其他成分混合均匀。染色时间通常为30-60分钟,脱色液可用10%冰醋酸。
二、银染液配方及步骤
银染法灵敏度更高,适合检测微量蛋白。其配方分为以下几步:
固定液:40%乙醇+10%冰醋酸
敏化液:0.02%硫代硫酸钠
银染液:0.1%硝酸银
显影液:2%碳酸钠+0.04%甲醛
操作时需严格按顺序进行,每步5-15分钟,显影至条带清晰后立即终止。
三、染色液使用小贴士
实验中有几个细节值得注意:
染料过滤:使用前用滤纸过滤可避免背景沉淀
保存条件:考马斯亮蓝液避光保存,银染液现配现用
安全防护:操作银染液时戴手套,避免接触皮肤
环保处理:含重金属废液需单独收集处理
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