PCR试剂扩增后操作指南

一、扩增产物的理想保存方式

刚完成的PCR产物就像刚出炉的蛋糕，保存方式直接影响后续实验结果。建议：

1. 短期使用（1周内）：4℃冷藏，避免反复冻融

2. 长期保存：-20℃分装，加入稳定剂可维持半年

3. 重要样本：建议同时保存于-80℃和纸质记录本

二、电泳前的准备要点

跑胶前的准备工作决定了条带是否清晰美观：

• 琼脂糖浓度：1.5%适合100-1000bp片段

• 上样缓冲液：按1:5比例混合产物

• 染料选择：SYBR Safe比EB更安全

• 电压设置：5V/cm胶长度最理想

三、异常条带排查技巧

当电泳结果出现意外条带时，可以这样逐步排查：

1. 引物二聚体：降低镁离子浓度2mM

2. 非特异性扩增：提高退火温度2-3℃

3. 模板污染：更换新配制的dNTPs

4. 杂带：尝试Touch-down PCR程序

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