概述
二区探针，又称TaqMan探针或水解探针，是实时荧光定量PCR（qPCR）中最常用的荧光标记核酸探针之一。这种探针由单链DNA或RNA组成，5'端带有荧光报告基团，3'端带有淬灭基团。在PCR扩增过程中，当探针与目标序列结合时，Taq DNA聚合酶的5'→3'外切酶活性会水解探针，使荧光报告基团与淬灭基团分离，从而释放荧光信号。 二区探针因其高特异性和灵敏度，被广泛应用于基因表达分析、病原体检测、SNP分型等领域。在实际应用中，二区探针的设计和优化是qPCR实验成功的关键因素之一。
物理化学性质
二区探针通常由18-30个碱基的单链DNA或RNA组成，长度过短可能导致特异性下降，过长则可能影响杂交效率。探针的Tm值（熔解温度）应比引物的Tm值高5-10℃，通常在65-70℃之间。 探针的5'端通常标记有荧光报告基团，如FAM、HEX、CY5等，3'端则带有淬灭基团，如TAMRA、BHQ、MGB等。报告基团和淬灭基团的选择需根据实验设备和检测需求而定。探针的纯度和浓度直接影响实验结果的准确性和重复性。
主要用途
二区探针主要用于实时荧光定量PCR（qPCR）检测，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、SNP分型等领域。在基因表达分析中，二区探针可以精确量化目标基因的转录水平，帮助研究者了解基因调控机制。 在病原体检测中，二区探针的高特异性使其能够准确区分不同病原体，甚至检测低拷贝数的病原体核酸。在SNP分型中，二区探针可以区分单个碱基的差异，为遗传病诊断和药物基因组学研究提供有力工具。
安全与储存
二区探针通常以冻干粉末或液体形式提供，储存时应避免光照和高温。-20℃避光保存是最佳选择，避免反复冻融以保持探针的稳定性。使用前应充分溶解并混匀，必要时进行离心以去除气泡。 操作二区探针时需佩戴手套和护目镜，避免直接接触皮肤和眼睛。如不慎接触，应立即用大量清水冲洗，必要时寻求医疗帮助。废弃的探针溶液应按照生物有害废物处理规程进行处置。
B2B采购指南
采购二区探针时，需明确探针的长度、序列、荧光基团类型和淬灭基团类型。探针的长度通常为18-30个碱基，序列需与目标序列完全互补。荧光基团和淬灭基团的选择应根据实验设备和检测需求而定。 探针的纯度是影响实验结果的关键因素，通常要求HPLC纯度≥95%。价格受探针长度、修饰基团、纯度和订购量影响，约500-2000元/条（20bp长度）。建议选择信誉良好的供应商，并提供详细的序列设计和修饰要求。
常见问题
二区探针和SYBR Green有什么区别？
二区探针具有高特异性，只能检测目标序列，而SYBR Green可以结合任何双链DNA，特异性较低。二区探针适用于多重PCR和高特异性检测，SYBR Green适用于快速筛查和经济型实验。
如何设计二区探针？
设计二区探针时，长度通常为18-30个碱基，Tm值比引物高5-10℃。避免在探针序列中出现重复序列或二级结构。GC含量应在30-80%之间，最好在40-60%之间。5'端避免G碱基，以减少荧光淬灭。
二区探针的荧光信号弱怎么办？
可能原因包括探针浓度过低、淬灭效率高、PCR效率低或探针降解。建议优化探针浓度（50-250nM），检查淬灭基团是否匹配，确保PCR条件优化，并验证探针完整性。
二区探针可以用于多重PCR吗？
可以，但需选择不同荧光报告基团的探针，并确保各探针的Tm值相近。多重PCR时，还需优化引物和探针的浓度比例，避免交叉反应和信号干扰。
二区探针的保存期限是多久？
冻干粉末在-20℃下可保存1-2年，溶解后的探针在-20℃下可保存6-12个月。避免反复冻融，建议分装保存。使用前应检查探针是否降解或沉淀。
相关厂家
- 主营：嵌段共聚物、合成磷脂、荧光染料、近红外二区探针TTQ、PEG、点击化学、量子点
- 主营：成像系统、小动物活体成像、荧光成像、近红外二区成像系统、纳米探针、红外二区成像、二区探针、稀土探针、成像实验探针、生物成像系统、全光谱成像、X射线成像、三维成像系统、荧光寿命成像、红外成像系统、动物活体成像、活体成像系统、多通道成像、光学成像系统、多模态成像、显微成像系统、显微成像、多功能成像系统
- 主营：金纳米、三角片、麦芽糖、近红外二区发射、羟丙基、ito薄膜、氮化钛、tio2纳米、碳粉tio2、修饰tio2、pd纳米笼、水溶伊红、纳米复合、磁性纳米、蛋白芯片、包硅金银、硅纳米线、包硅纳米、硅纳米管、螯合树脂、油溶性银、复合材料、薄膜定制、纳米粒子
- 主营：PLGA、透明质酸、聚乙内酯、磷脂聚乙二醇、胆固醇聚乙二醇、功能化聚乙二醇、硬脂酸聚乙二醇、聚乳酸、葡聚糖、DOPE
- 主营：土壤养分检测仪、食品安全检测仪、程控定量封口机、探针式植物茎流测量仪、蜂蜜检测仪、COD检测仪、农药残留检测仪、光合作用测定仪、土壤检测仪、多参数水质检测仪、土壤呼吸测定仪、浮游菌采样器、叶绿素测定仪、兽药残留检测仪、水质检测仪、微波消解仪、荧光定量pcr仪、牛奶分析仪、植物蒸腾仪、微生物检测仪、悬浮物检测仪、气相色谱仪、液体密度计、尘埃粒子计数器、辣椒素检测仪
- 主营：测试机、仪测试、检验机、牙周探针扭矩测试仪、测验仪、护目镜、卫生巾、astmf2992、测定机、耐磨仪、强力仪、nbs橡胶、织物胀、卫生纸、老化箱、检测仪、灼热丝、试验机、试验仪、纸尿裤、能检验、测定仪、呼吸气密、测试温度、口罩耳带、性测试仪
- 主营：探针弹簧、导管弹簧
- 主营：休止角测定仪、安息角测定仪、松装密度仪、四探针测试仪、四探针电阻测试仪、振实密度仪、堆积密度测定仪、表观密度测定仪、霍尔流速计、压实密度仪、粉末电阻率测试仪、粉末流动性测试仪、粉体特性测试仪、堆密度仪、表面电阻率测试仪、体积电阻率测试仪、方阻仪、电压降测试仪、方块电阻测试仪、颗粒强度测定仪、粉体综合特性测试仪、电阻率测试仪、粉体流动性测试仪、方阻计、材料电阻率测试仪
- 主营：探针台、探针台配件、晶圆探针台、半导体探针台、射频探针台、光电探针台、低温探针台、高温探针台、高低温探针台、闭循环高低温探针台、手动探针台、常温探针台、探针、探针夹具、探针座
- 主营：探针台、探针夹具、定位器
- 主营：闪测仪、试验机、检测仪、二次元测量仪、测量仪、工业投影仪、圆度仪、测量机、圆柱度仪、刀具测量仪、影像测量仪、高低温试验箱、冷热冲击试验箱、拼接测量仪、紫外老化实验机、双柱拉力机、恒温恒湿试验箱、落地轮廓仪、伺服拉力机、手动影像仪、半自动影像测量仪、光学影像测量、粗糙度轮廓仪、自动影像测量仪、拉力试验机
- 主营：测试仪、试验锥、试验钩、测试探针、试验销、屏蔽室、接收器、分析仪、天线塔、网络盒、试验针、试验棒、测试棒、关节试验、锥形工具、圆柱工具、儿童试验、直流电源、试验探棒、楔形工具、楔形手指、试验指甲、汽车电源、磁场探棒、测试导轨
- 主营：光谱仪、激光器、光子源、毫米波探针、摄像头、测量仪、采集卡、放大器、单色仪、护目镜、传感器、扫描镜、超稳腔、增强器、滤光片、成像仪、功率计、光纤束、示波器、鉴相器、探测器、磁强计、相位计、照度计、检测仪、激光管
- 主营：图像仪、分析仪、测定仪、四探针粉末、休止角、颠转仪、分布仪、超硬堆积、麦克堆积、微粉堆积、400目松装、砂浆堆积、石子堆积、胶粉堆积、水泥砂浆、粉末堆积、集料堆积、碎石堆积、砂子堆积、图像颗粒、密度仪器、填料堆积、粉末粉体、容量计松装、图像检测仪、图像处理仪
- 主营：沥青仪器、土工布实验仪、粗粒土实验仪、四探针电阻率测试仪、路强仪、固结仪、鼓风干燥箱、砂浆抗渗仪、水泥检测仪、压力试验机、抗折抗压一体机、管材检测仪、防水卷材检测仪、门窗性能检测、保温性能检测、搅拌机、标准养护室、养护箱、恒温溢流水箱、振实台、实验夹具、实验室仪器、胀破强度试验
- 主营：圆度仪、轮廓仪、关节臂、探针、X-RAY、测针、三坐标
- 主营：载带、胶盘、连接器载带、探针载带、铝箔袋、热封盖带、自粘盖带