概述
Sulfo-Cy5.5是一种磺化花青素染料,属于近红外荧光染料家族。在生物医学研究中,近红外区的荧光信号能有效减少生物组织的自发荧光干扰,提高信噪比。 与普通Cy5.5相比,磺化基团的引入显著提高了水溶性,使其更适合于生物标记应用。许多实验室反馈,Sulfo-Cy5.5标记的抗体或蛋白在生理条件下稳定性更好,非特异性吸附更低。
物理化学性质
Sulfo-Cy5.5的最大吸收波长约675nm,发射波长约694nm,处于近红外窗口(650-900nm)。这一波段的光穿透生物组织深度可达数厘米,特别适合活体成像。 其量子产率通常在0.2-0.3之间,摩尔消光系数高达约250,000 M-1cm-1。磺酸基团使其水溶性极佳,在PBS缓冲液中的溶解度可达10mM以上。光稳定性优异,连续照射1小时后荧光强度保持率超过90%。
主要用途
在分子影像领域,Sulfo-Cy5.5常用于标记抗体、多肽或小分子药物,用于肿瘤靶向成像研究。实际操作中,标记效率可达80-90%,且不影响被标记物的生物活性。 流式细胞术中,Sulfo-Cy5.5是检测低丰度抗原的理想选择,因其荧光信号强且背景低。体外诊断方面,常用于免疫层析试纸条和微流控芯片的标记,检测灵敏度可达pg/mL级。
安全与储存
虽然Sulfo-Cy5.5毒性较低,但仍建议在通风橱中操作粉末形式。溶解后的溶液在4°C避光条件下可稳定保存2-3周,-20°C可保存数月。 长期储存建议分装后冻存于-20°C,避免反复冻融。冻干粉在-20°C干燥避光条件下可稳定保存2年以上。废弃物应按照有机染料废物处理规定处置。
B2B采购指南
采购时需关注纯度(HPLC≥95%)、游离染料含量(≤5%)、水分含量(≤5%)等指标。不同批次的染料可能存在批次差异,建议进行小试确认性能。 价格受纯度、包装规格影响较大,1mg包装约200-300元,10mg包装约1500-2000元。知名供应商包括Lumiprobe、AAT Bioquest、Thermo Fisher等,不同品牌在标记效率上可能略有差异。
常见问题
Sulfo-Cy5.5与Cy5.5有何区别?
主要区别在于水溶性。Sulfo-Cy5.5含有磺酸基团,水溶性显著优于Cy5.5,更适合生物标记应用,但脂溶性较差。
如何提高标记效率?
建议使用新鲜配制的染料溶液,控制反应pH在8.5-9.0,加入适量有机助溶剂如10-20% DMSO可提高疏水蛋白的标记效率。
标记后如何纯化?
常用方法包括脱盐柱、透析或超滤。对于抗体标记,Protein A/G柱可有效去除游离染料和过度标记的抗体。
荧光信号弱可能的原因?
可能原因包括:染料降解(检查储存条件)、标记率低(优化反应条件)、检测仪器滤光片不匹配(确认激发/发射波长设置)。
能否用于活细胞成像?
可以,但需注意浓度控制。一般工作浓度1-10μM,孵育时间30-60分钟。高浓度可能导致细胞毒性。
