概述
大鼠内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，本质为脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）。在免疫学研究中，它被公认为最强大的天然免疫刺激剂之一。实验室常从大肠杆菌等菌株提取，但不同来源的LPS结构存在显著差异。 其分子结构包含三个区域：疏水的脂质A（活性中心）、核心寡糖和O-抗原多糖链。脂质A的酰化程度直接影响毒性强弱，这解释了为什么不同批次产品活性可能存在差异。在动物实验中，0.1-1 μg/kg剂量即可诱发典型全身炎症反应综合征（SIRS）。
物理化学性质
内毒素的热稳定性极强，常规高压灭菌（121℃ 20分钟）不能完全灭活，需250℃干热30分钟以上才能破坏。这种特性使得它在医疗器械消毒检测中成为关键指标。 其水溶液在pH6-8时最稳定，强酸强碱条件会降解脂质A结构。紫外吸收特征峰在205nm附近，但该性质很少用于定量分析。实际工作中主要依靠鲎试剂（LAL）法测定内毒素活性单位（EU），这是国际公认的标准方法。
主要用途
在基础研究中，内毒素是建立脓毒症、急性肺损伤等炎症模型的黄金标准工具。5-10mg/kg腹腔注射可在6小时内诱导大鼠出现典型休克症状。 在应用领域，超低剂量（ng级）的内毒素可作为疫苗佐剂增强Th1型免疫应答。制药行业则用其检测注射剂和医疗器械的热原污染，中国药典规定静脉注射剂内毒素限值为5EU/kg/h。
安全与储存
操作内毒素必须遵守二级生物安全防护标准，实验应在生物安全柜中进行。意外暴露可能导致发热、寒战等类流感症状，严重者需医疗干预。 储存时应避免反复冻融导致活性下降，建议分装为单次使用量。溶解后的工作液在4℃可保存1周，-20℃可保存1个月。长期保存应置于-80℃，但即使如此每年仍有约5%的活性损失。
B2B采购指南
科研级内毒素需关注三个核心指标：活性（通常为1-10×10^6 EU/mg）、蛋白污染（应<1%）和核酸污染（应<0.1%）。Sigma的LPS-EB系列（约300元/100μg）和InvivoGen的UltraPure系列（约400元/100μg）是常用品牌。 工业级采购更看重批间一致性，建议选择通过FDA认证的供应商。检测用标准品需附带NIBSC或USP的标定证书，这类产品价格可达常规试剂的5-10倍。运输过程必须使用干冰维持低温链。
常见问题
内毒素和热原有什么关系？
内毒素是主要的热原物质，但热原还包括某些蛋白质和核酸。药典检测中，1EU约等于0.1-0.2ng内毒素。
为什么不同批次活性差异大？
这与提取菌株、纯化工艺有关。大肠杆菌O111:B4株活性最强，而沙门氏菌提取物活性可能低10倍。
如何避免实验污染？
所有接触物品需250℃烘烤4小时或浸泡在0.1M NaOH中12小时。操作台面建议使用专用去热原清洁剂。
动物实验剂量如何确定？
小鼠LD50约10-20mg/kg，但研究用剂量通常为1-5mg/kg。建议先做预实验，根据品系和实验目的调整。
细胞实验出现异常结果怎么办？
首先排查FBS和培养基污染（阈值通常<0.05EU/ml）。建议设置LPS中和剂（如多粘菌素B）对照。
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