概述
兔骨髓巨噬细胞（RBMMs）是从兔子骨髓中通过密度梯度离心和贴壁法分离获得的免疫细胞，是天然免疫系统的重要组成部分。长期从事细胞培养的研究人员发现，RBMMs在炎症和感染研究中表现出与人类巨噬细胞相似的功能特性。 这类细胞具有高度可塑性，可根据微环境极化为M1型（促炎）或M2型（抗炎）表型。在基础研究和药物开发中，RBMMs因其易于获取、培养稳定和功能明确，成为替代人源巨噬细胞的常用模型。
物理化学性质
RBMMs在体外培养中呈悬浮或贴壁生长，形态随活化状态变化：静息时为圆形，活化后伸出伪足变为不规则形状。流式细胞术检测显示其高表达CD14、CD68等巨噬细胞标志物。 细胞直径约15-30微米，核质比较大，胞内富含溶酶体和吞噬体。电镜下可见表面褶皱和微绒毛，这些结构与其吞噬功能密切相关。RBMMs的代谢活性较高，依赖有氧糖酵解，培养时需提供充足葡萄糖和谷氨酰胺。
主要用途
RBMMs广泛应用于免疫学研究，如构建细菌/病毒感染模型（如结核杆菌、沙门氏菌），评估病原体-宿主相互作用。在药物研发中，用于筛选抗炎药（如检测TNF-α抑制率）或免疫增强剂（如吞噬活性测定）。 疫苗开发领域常用其评价抗原递呈效果。近年来，RBMMs还被用于肿瘤免疫治疗研究，如检查点抑制剂对巨噬细胞极化的影响。据统计，约30%的巨噬细胞相关研究使用兔源细胞。
安全与储存
RBMMs需在二级生物安全实验室（BSL-2）中操作，尤其是感染性实验。细胞冻存应使用程序降温盒，以1°C/min速率降至-80°C后转入液氮，避免冰晶损伤。复苏时需快速水浴并立即更换培养基。 培养废弃物需经121°C高压灭菌30分钟处理。操作中若接触细胞悬液，应立即用75%乙醇消毒。长期保存建议使用含10%DMSO的胎牛血清冻存液，避免反复冻融（最多冻融1-2次）。
B2B采购指南
采购时需关注：1）细胞代次（原代或传代，建议选用P2-P4代）；2）培养基成分（如含10-15%FBS的DMEM或RPMI 1640）；3）配套试剂（如LPS、IFN-γ等刺激剂）。 国际供应商如ATCC、Sigma-Aldrich提供认证细胞系，价格较高（约1500-3000元/10^6细胞）；国内生物公司如赛业生物、上海酶联性价比更优（约500-1500元）。批量采购可议价，但需核实COA（分析证书）和STR鉴定报告。
常见问题
RBMMs和人巨噬细胞有何区别？
兔细胞对某些病原体（如兔热杆菌）更敏感，且繁殖周期短，成本更低。但人源细胞（如THP-1）与临床相关性更强，需根据实验目的选择。
如何评估RBMMs活性？
常用台盼蓝染色测活力（＞90%合格），CCK-8或MTT测增殖，吞噬荧光微球测功能。建议收货后24小时内完成质检。
培养时出现污染怎么办？
立即隔离污染培养皿，用0.1%SDS处理废弃。预防措施：定期换液、使用双抗（青霉素/链霉素）、检测支原体。
能冻存多久？
液氮中可保存5年以上，但建议2年内使用以保证活性。冻存管标注代次、日期和培养基信息。
为什么贴壁不均匀？
可能原因：1）培养皿未包被（建议用多聚赖氨酸）；2）血清质量差；3）接种密度过低（推荐2-5×10^5/cm²）。
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