概述
藻红蛋白R是从红藻中提取的一种天然荧光蛋白,属于藻胆蛋白家族。实验室经验表明,其荧光强度是荧光素的约30倍,是流式细胞术中最常用的荧光标记物之一。 它具有独特的αβγ三聚体结构,每个分子含34个发色团,这种密集的发色团排列使其具有极高的荧光量子产率(约0.82)。在生物检测领域,R-PE因其优异的性能已成为金标准荧光探针,特别适合需要高灵敏度的检测应用。
物理化学性质
R-PE的最大激发峰在约565nm(绿色光区),发射峰在约575nm(橙红色光区)。这种光谱特性使其非常适合与488nm激光器配合使用,这是流式细胞仪最常见的配置。 其分子量约240kDa,由α(20kDa)、β(20kDa)和γ(30kDa)三个亚基组成。pH稳定性良好(6-9),在4℃保存条件下可维持数月活性不变。值得注意的是,它的荧光寿命约3.8ns,这为时间分辨荧光检测提供了可能。
主要用途
流式细胞术是R-PE最大应用领域,约占总用量的60%。它常与FITC搭配使用,利用488nm激光同时激发两种染料,实现多参数分析。在临床诊断中,CD4+ T细胞计数等关键检测都依赖R-PE标记抗体。 免疫荧光染色约占30%应用,R-PE标记的二抗能显著提高检测灵敏度。其余10%用于荧光原位杂交(FISH)和微阵列检测。近年来,R-PE与量子点联用的多色检测系统发展迅速,可同时检测15种以上标志物。
安全与储存
R-PE本身无显著毒性,但作为生物制品需防止微生物污染。实验室常规操作无需特殊防护,但大规模生产时建议在生物安全柜中操作。 储存关键点在于避光和防止反复冻融。4℃短期保存可加0.1%叠氮钠防腐,长期储存建议分装后-20℃冻存。冻干粉形式稳定性更好,但复溶后需立即使用或短期保存。溶液形式产品通常保质期6-12个月。
B2B采购指南
采购时需关注纯度(A565/A280比值应≥4.0)、活性(荧光强度)、偶联效率等指标。专业供应商会提供详细的质检报告,包括SDS-PAGE纯度分析和流式验证数据。 价格受纯度、包装规格影响较大,1mg冻干粉约200-500美元,预偶联抗体价格可达1000-5000美元/mg。建议选择Sigma、BioLegend、BD Biosciences等知名品牌,或要求供应商提供应用验证数据。少量采购可选择50μg/100μg小包装试用品。
常见问题
R-PE和APC有什么区别?
R-PE激发/发射在565/575nm,适合488nm激光;APC在650/660nm,需640nm激光。R-PE亮度更高但APC更适合多色组合,两者常搭配使用。
如何提高R-PE标记效率?
使用新鲜制备的R-PE,优化pH8.0-8.5缓冲条件,添加5-10mM EDTA防止聚集,避免过度搅拌。专业实验室通常采用2-3倍摩尔过量的R-PE。
R-PE溶液变浑浊怎么办?
可能是蛋白聚集或微生物污染。轻微浑浊可通过0.22μm过滤恢复,严重浑浊建议弃用并检查储存条件。
R-PE能用于体内成像吗?
不适合。R-PE分子量大(240kDa),体内清除快,且激发光组织穿透性差。体内成像建议使用近红外探针如Cy7或量子点。
如何判断R-PE是否失活?
检测A565/A280比值下降(应≥4.0),荧光强度显著降低,或流式检测信号减弱。定期用校准微球验证性能。
相关厂家
- 主营:催化剂、peg试剂、cy5四氮、活性脂、苯二胺、2406-34-0、乙氧基、试剂cas、环辛烯、生物素、cb-cyclam、实验室、dbco-acid、半乳糖、溴苯基、交联剂、环己炔、荧光素、3694-51-7、ac4galnal、2001-96-9、葡萄糖、环辛炔、直发cas、糖化学
- 主营:反应活、修饰剂、催化剂、hydrazide、糖蛋白、连接子、激动剂、聚合物、活性脂、胆固醇、钆特酸、催化性、dna标记、络合剂、荧光试剂、雨蛙素、乙二胺、ped结构、衍生物、化合物、链接剂、反应物、生物素
- 主营:在水中、包含肽、含叠氮、Phycoerythrin、丙炔基、由氨基、菁染料、peg单元、具有炔、胺hcl盐、阿尔法、催化剂、peg试剂、结构式、氨基nh2、3694-51-7、碘化物、4727-50-8、具有两、带有炔、磺酸基、3065-79-0、aminopeg8、甲基九、bcn基团、荧光素
- 主营:培养添加因子、标记试剂盒、特色二抗、蛋白纯化试剂盒、单抗融合套装、ELISA试剂盒
- 主营:荧光染料、荧光探针、转染试剂、试剂盒、胎牛血清、抽提试剂、萤光素钠盐、萤光素钾盐、核酸荧光染料、抗荧光淬灭剂
- 主营:加帽酶、激活剂、甘氨酸、脂蛋白、igg抗体、稳定液、玻璃板、试剂盒、超纯水、激动剂、胆固醇、盐酸盐、褪黑素、因质粒、扩容剂、组化笔、驴抗人、预制胶、驴抗兔、生物驴、草甘膦、重组酶、生物素、曲拉通、去除剂
- 主营:草铵膦、恶霜灵、雌酚酮、藻红蛋白、溴虫腈、标准品、氟环唑、苯甲酸、大观霉素、恶唑菌酮、异丙氧磷、多拉菌素、氘代甲苯、呋喃西林、氟罗沙星、3-二氯丙烯、吡氟氯禾灵、二氯吡啶酸、二甲基吗啉、一氯二溴甲烷、硝基呋喃妥因
- 主营:检测试剂盒、Elisa试剂盒、农残检测试剂盒、ReadiUse、试剂、液相检测、测试盒、检测卡、比色法检测、荧光法检测
- 主营:染料cy3、双nhs酯、50x荧光、ifluor820、ifluor790、ifluor647、1mg蛋白、pcr定量、ifluor860、ifluor460、rna定量、蛋白酶、ifluor810、试剂盒、atp分析、橙钠盐、探针hpf、派诺宁、生物素、刚果红、cy7酰肼、探针apf、抑制剂、funxite-1、封闭剂
- 主营:异硫氰酸胍、二硫苏糖醇(DTT)、β巯基乙醇、三(羟甲基)氨基甲烷tris、蛋白酶k、焦碳酸二乙酯DEPC、EDTA二钠、十二烷基苯磺酸钠
- 主营:咽鳞癌细胞、结肠癌细胞、急性淋巴细胞、藻红蛋白、永生化表皮细胞
- 主营:ReadiUse、试剂盒、抗体、试剂
