概述
多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）家族包含17个成员，其中PARP1研究最为深入，占细胞内PARP活性的80%以上。在DNA单链断裂修复中，PARP1能每分钟催化数百个ADP-核糖单元聚合形成长链聚合物。 该酶通过识别DNA损伤位点被激活，随后修饰组蛋白和其他修复蛋白，招募XRCC1等修复因子。PARP抑制剂与BRCA突变存在合成致死效应，这一发现彻底改变了卵巢癌等恶性肿瘤的治疗策略，使PARP成为肿瘤靶向治疗的热门靶点。
物理化学性质
PARP1由1014个氨基酸组成，包含N端DNA结合域（含两个锌指模体）、自修饰域和C端催化域。其活性依赖NAD+作为底物，最适pH为8.0-9.0，Mg2+可增强活性。 酶活性检测通常采用32P-NAD+掺入法或ELISA法。值得注意的是，PARP1在体外实验中易受蛋白酶降解，保存时需添加蛋白酶抑制剂。重组蛋白常以冻干粉形式提供，复溶后活性保持约6小时（4℃）。
主要用途
在基础研究中，PARP活性检测是评估DNA损伤程度的金标准。临床前研究显示，PARP1敲除小鼠对烷化剂敏感性提高5-10倍，这为化疗增敏提供了理论依据。 目前FDA已批准奥拉帕尼等6种PARP抑制剂用于卵巢癌、乳腺癌等治疗。在合成生物学领域，PARP信号通路被用于构建DNA损伤生物传感器。工业上还开发了PARP活性检测试剂盒，用于药物筛选和毒性评估。
安全与储存
PARP相关实验需在生物安全柜中进行，避免气溶胶产生。接触高浓度PARP抑制剂可能引起骨髓抑制，操作时需穿戴防护装备。 重组蛋白应分装储存于-80℃，避免反复冻融导致活性丧失。工作液建议现配现用，含0.1%BSA的PBS缓冲液可稳定活性4-8小时。废弃物需经121℃高压灭菌30分钟处理。
B2B采购指南
科研级PARP分三类：全长蛋白（适合功能研究）、催化结构域（适合抑制剂筛选）、突变体（机制研究）。活性单位定义多为每分钟转移1nmol ADP-核糖为1U。 国际供应商如Sigma-Aldrich、Enzo报价较高（约5000元/μg），国内义翘神州等品牌性价比更优（约2000元/μg）。采购时需索要COA证书，重点关注比活性（≥1000U/mg）和批次一致性。
常见问题
PARP抑制剂为什么对BRCA突变肿瘤有效？
BRCA突变导致同源重组修复缺陷，PARP抑制又阻断碱基切除修复，形成合成致死效应。临床数据显示奥拉帕尼使BRCA突变卵巢癌PFS延长近3倍。
如何检测PARP活性？
PARP1和PARP2有何区别？
PARP抑制剂有哪些副作用？
实验室如何保存PARP蛋白？
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