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大鼠食欲素

更新时间:2026-07-15

概述

大鼠食欲素是1998年由美国Scripps研究所发现的下丘脑神经肽,最初因其促食欲作用被命名。在神经科学研究领域,它被认为是连接代谢状态与觉醒系统的关键信号分子。 实际上由两种肽类组成:Orexin A(33个氨基酸)和Orexin B(28个氨基酸)。它们通过激活OX1和OX2受体调节多种生理功能。在动物实验中,大鼠模型是研究食欲素系统最常用的对象,其氨基酸序列与人类有85%的同源性。

物理化学性质

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Orexin A分子量3562.1 Da,含两对二硫键,结构稳定性较高。冻干粉末在-20°C下可保存2年,但水溶液在4°C仅能稳定24小时。实验室常用浓度为10-100nM进行细胞实验,动物实验剂量为1-10nmol/只。 溶解时建议使用含0.1%BSA的PBS缓冲液,可减少管壁吸附损失。质控标准通常要求HPLC纯度≥95%,质谱确认分子量,生物活性需通过钙流实验验证。

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主要用途

在基础研究中,主要用于:1)摄食行为调控实验,中枢注射1nmol Orexin A可使大鼠摄食量增加50-80%;2)睡眠-觉醒研究,敲除Orexin基因的大鼠会出现发作性睡病样症状。 在应用领域,OX受体拮抗剂已开发为失眠治疗药物(如苏沃雷生)。此外,Orexin系统与成瘾、抑郁、癫痫等神经精神疾病相关,是重要的药物靶点。

安全与储存

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作为生物活性肽,需按BSL-2级标准操作。冻干粉开封前应平衡至室温避免吸潮,推荐用无菌水或缓冲液配制母液,经0.22μm滤膜除菌后分装。 实验废弃物需121°C高压灭菌30分钟处理。意外接触皮肤应立即用大量清水冲洗,眼部接触需用生理盐水冲洗15分钟。长期储存建议添加蛋白酶抑制剂混合物防止降解。

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B2B采购指南

科研用Orexin产品主要有三种规格:1)合成肽(约2000-5000元/mg);2)重组蛋白(约1500-3000元/10μg);3)检测试剂盒(ELISA试剂盒约3000-6000元/96T)。 选购时需确认:1)种属特异性(大鼠/小鼠/人源);2)纯度(HPLC≥95%);3)生物活性数据(EC50值);4)是否提供质谱和HPLC报告。国际品牌如Tocris、Sigma质量稳定但价格较高,国内生物公司如翌圣、雅酶性价比更优。

常见问题

Orexin A和B有何区别?

A为33肽含二硫键,选择性激活OX1R;B为28肽无二硫键,对OX1R/OX2R无选择性。A半衰期更长(约30分钟vs 10分钟),中枢作用更强。

如何验证购买的Orexin活性?

可通过钙流实验检测受体激活能力,或进行动物摄食实验。正规供应商应提供质谱和HPLC纯度报告,以及参考文献中的EC50数据。

实验给药方式有哪些?

常用脑室注射(ICV)或特定核团微量注射,剂量1-10nmol/只。外周给药因血脑屏障穿透性差,效果有限。

为什么我的Orexin溶液出现沉淀?

可能原因:1)溶解不充分-需短暂超声;2)缓冲液pH不当-建议pH7.4;3)浓度过高-母液建议≤1mM;4)反复冻融-应分装保存。

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