概述
支原体肉汤是微生物学实验室中专门用于培养支原体(Mycoplasma)的液体培养基。这类无细胞壁的微生物对营养要求极为苛刻,常规培养基无法满足其生长需求。实验室资深技术人员都知道,配制一支合格的支原体肉汤需要精准把握多个关键成分的比例。 标准配方通常包含脑心浸液、酵母提取物等基础成分,并需添加10-20%灭活马血清或胎牛血清提供必需生长因子。在临床微生物检验和细胞培养质量控制中,支原体肉汤培养法仍是检测的金标准,灵敏度可达1-10 CFU/mL。
物理化学性质
成品支原体肉汤呈弱碱性(pH 7.6-7.8),渗透压约280-320 mOsm/kg,与哺乳动物细胞生理环境相近。经验丰富的实验员会特别注意,培养基颜色变化(从琥珀色变粉红)往往提示pH值下降和支原体生长。 关键成分包括:蛋白胨提供氮源;葡萄糖作为能量来源;精氨酸促进某些支原体株系生长;酚红作为pH指示剂。血清添加前需56℃灭活30分钟以去除补体活性,这是保证支原体生长的重要步骤。
主要用途
临床应用主要针对呼吸道、泌尿生殖道标本的支原体分离培养,如肺炎支原体、人型支原体等。阳性培养液可通过PCR或代谢活性检测进一步确认。 在生物制药领域,支原体肉汤用于细胞库和病毒疫苗的支原体检疫,通常需培养28天。科研应用中则用于支原体致病机制研究、药敏试验等,某些特殊配方还可用于难培养支原体如发酵支原体的分离。
安全与储存
未开封成品培养基在2-8℃可保存6-12个月,但添加血清后有效期缩短至1-3个月。实验室自配培养基建议现配现用,4℃保存不超过2周。长期从事支原体研究的专家建议,每批培养基使用前应做无菌试验和生长性能测试。 操作时需在生物安全柜中进行,特别是处理临床标本时。废弃培养物需121℃高压灭菌30分钟,血清成分可能产生泡沫需注意灭菌容器留足空间。
B2B采购指南
商业成品培养基主要分两种:完全培养基(含血清)和基础培养基(需自行添加血清)。采购完全培养基时,务必确认血清来源和浓度,不同支原体株系对血清类型有偏好。 核心质量指标包括:无菌保证、支原体生长支持能力(通常以ATCC标准株测试)、内毒素含量(应<1EU/mL)。国际品牌如BD BBL、Oxoid质量稳定但价格较高(约500元/500mL),国内品牌如海生物、路桥性价比更优(约200-300元/500mL)。
常见问题
支原体肉汤变浑浊一定是污染吗?
不一定。支原体生长通常仅引起轻微浑浊,明显浑浊可能为细菌污染。需镜检确认:支原体无典型形态,细菌可见特定形态。
可以自己配制支原体肉汤吗?
可以但难度较大。关键在原料质量控制(如酵母提取物批次差异)和血清筛选。建议新手从商业基础培养基开始,仅自行添加血清。
培养多久可以判定阴性?
临床标本通常培养5-7天,细胞检疫需21-28天。但某些慢生长支原体(如发酵支原体)可能需要更长时间。
为什么培养要加酚红指示剂?
支原体代谢产酸使培养基变黄(酚红变黄),是初步判断生长的依据。但最终确认需通过PCR或特异性染色。
能用胎牛血清替代马血清吗?
可以,但不同支原体株系适应性不同。肺炎支原体对马血清适应性更好,而人型支原体对胎牛血清反应更佳。
相关厂家
- 主营:试剂盒、增菌液、平板9cm、肉汤lb2、m17琼脂、化妆品、blb琼脂、培养皿、肠球菌、mrs琼脂、gam琼脂、bhi琼脂、培养基、厌氧产、营养琼脂、菌落计数、采样管、采样袋、水样采集袋、菌片、分离培养、琼脂平板、食品检验、药典、鉴定条
- 主营:大肠杆菌、琼脂培养基、磷酸盐缓冲液、7h9肉汤、肉汤管、胰蛋白胨胆盐
- 主营:大肠杆菌、琼脂平皿、琼脂平板、tge肉汤、双歧杆菌、isp培养基、pcfa培养基、琼脂培养基、一次性试管、硫乙醇酸盐、生理盐水管、高压灭菌袋、korthof培养基、蛋白胨培养基、检定用培养基、无机铁磷培养基、中和增菌培养基
- 主营:蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、胰酵素、崩溃酶、蜗牛酶、乳糖酶、肌酸激酶、葡球菌酶、绿色木霉、心肌黄酶、亮抑酶肽、纤维素酶、木聚糖酶、-glucosidase、亮抑肽酶、硫代辅酶、枯草杆菌、羧化辅酶、氯化酵素、脆壁质酶、细胞溶解酶、乙醇脱氢酶、透明质酸酶、氯化溶菌酶
- 主营:科研试剂、高效试剂
- 主营:马铃薯、增菌液、噬菌体、PPLO肉汤基础、营养盐、串珠菌、琼脂粉、西红柿、活性炭、营养液、酵母氮、基础盐、血琼脂、酵母膏、磁螺菌、缓冲液、抑菌剂、培养基、氯化钠、玉米粉、三糖铁、洗脱液、中和剂、结冷胶、沉降菌、橄榄油
- 主营:研突破、转座酶、重组酶、连接酶、研试剂、(5×)(with、recombinant、结合蛋白、胶体染料、核酸染料、助力科研、大肠杆菌、泛素蛋白、实验室用品、重组肠激酶、电泳缓冲液、拓扑异构酶、热敏磷酸酶、检测试剂盒、全能核酸酶、核酸外切酶、核酸内切酶、连接试剂盒、碱性磷酸酶、微球菌核酸酶
- 主营:感受态、扁桃体、淋巴管、肺炎支原体肉汤基础、干细胞、狗血浆、羊血浆、导管癌、原细胞、青霉素、营养液、无酚红、癌细胞、小细胞、胰腺癌、输尿管、抗凝鸡、缓冲液、鸭血清、猪血清、人韧带、培养基、肝素钠、牛血浆、马血清、白细胞
- 主营:骨细胞、腺嘌呤、微量法、PPLO肉汤、试剂盒、脂蛋白、提试剂、增菌液、测试盒、光度法、瘤细胞、纤维素、信号素、缺锌ynb、病毒探、肝细胞、饥饿素、外泌体、粘蛋白、蛋白酶、混合液、半乳糖、抑制剂、激活肽、蛋白质、癌细胞
- 主营:PPLO肉汤、试剂盒、ELISA试剂盒
