概述
小鼠钙蛋白酶是钙离子依赖的胞内半胱氨酸蛋白酶家族，1980年由日本学者首次从大鼠肝脏中分离。在实验室常用的小鼠模型中，μ-calpain和m-calpain是研究最深入的两个亚型，它们通过切割特定蛋白参与细胞骨架重构、信号转导等重要生理过程。 从事细胞生物学研究的人员会发现，钙蛋白酶的活性窗口非常狭窄——需要精确的钙离子浓度调控（μ-calpain在微摩尔级，m-calpain在毫摩尔级激活）。这种特性使其成为理想的细胞应激响应分子，在病理状态下过度激活会导致阿尔茨海默病、肌营养不良等疾病相关蛋白异常降解。
物理化学性质
钙蛋白酶由80kDa催化亚基和30kDa调节亚基组成异源二聚体。μ-calpain在5-50μM Ca²⁺下激活，而m-calpain需要0.2-1mM Ca²⁺。实际实验中常观察到，当钙离子超过最适浓度时会发生自水解失活，这是其重要的自我调控机制。 酶活性检测通常使用荧光底物如Suc-LLVY-AMC，在Ex/Em=380/460nm下监测。最适温度37℃，但在25℃仍有约60%活性。值得注意的是，冻干粉复溶后需加入1-5mM DTT维持活性中心半胱氨酸的还原状态，否则酶活会快速下降。
主要用途
在基础研究中，约70%的应用聚焦于神经退行性疾病机制探索。例如用钙蛋白酶特异性抑制剂（如MDL28170）处理阿尔茨海默病模型细胞，可减少τ蛋白异常剪切。肌肉生物学研究占比约20%，通过监测μ-calpain活性变化评估肌肉萎缩程度。 工业领域主要用作体外蛋白消化工具酶，相比胰蛋白酶，其切割位点更具选择性（倾向疏水性氨基酸残基）。药物研发中用于筛选钙蛋白酶抑制剂类候选化合物，这类药物潜在适应症包括中风后神经保护、杜氏肌营养不良等。
安全与储存
根据WHO分类属生物安全1级试剂，但重组蛋白可能含微量宿主蛋白（如E.coli蛋白），建议在BSL-2环境下操作。粉末状产品易产生气溶胶，应在通风橱中称量，并佩戴N95口罩和护目镜。 储存时需特别注意：活性形式在4℃仅稳定2-3天，长期保存应分装于-80℃，避免反复冻融（超过3次冻融活性损失可达50%）。配套的10×反应缓冲液通常含250mM Tris-HCl（pH7.5）、10mM DTT，需-20℃避光保存。
B2B采购指南
采购时首要确认亚型特异性（μ-calpain Catalog#通常以'MUR'开头，m-calpain以'MLR'开头）。活性检测报告应包括Casein水解实验数据和SDS-PAGE纯度验证（建议选择≥90%纯度产品）。 价格受表达系统（E.coli表达比昆虫细胞便宜约30%）、标签类型（His标签比GST标签便宜）、活性单位影响。国际品牌如Calbiochem、Sigma质量稳定但价格较高（约5000元/100μg），国内义翘神州等供应商性价比更优（约2000元/100μg）。大批量采购可要求提供COA和MSDS。
常见问题
如何选择μ-calpain和m-calpain？
μ-calpain参与病理状态如缺血再灌注损伤，需低钙激活；m-calpain更多在生理条件下起作用，需高钙激活。根据研究目标选择，神经疾病多用μ型，肌肉研究多用m型。
为什么我的钙蛋白酶活性低？
可能原因：1)缓冲液未含足够DTT（需1-5mM）；2)钙离子浓度不当（μ型用50μM Ca²⁺，m型用1mM）；3)样品反复冻融；4)反应温度低于30℃。建议做阳性对照实验。
钙蛋白酶抑制剂有哪些？
常用MDL28170（膜通透性）、Calpeptin（特异性高）、E64d（不可逆抑制）。浓度通常10-100μM，需预实验确定。注意部分抑制剂也抑制其他半胱氨酸蛋白酶。
能否用于组织裂解液？
可以，但需注意：1)添加EDTA-free蛋白酶抑制剂；2)裂解液钙离子浓度需调整至对应亚型需求；3)建议4℃操作避免自水解。最好先用纯化蛋白优化条件。
与人的钙蛋白酶有何差异？
小鼠μ-calpain与人源序列同源性达92%，关键催化残基完全保守。但部分底物切割效率可能有物种差异，研究人疾病时建议用人源重组蛋白验证关键结果。
相关厂家
- 主营：ELISA试剂盒、PCR试剂盒、科研试剂
- 主营：小鼠钙蛋白酶、试剂盒
- 主营：钙蛋白酶1、试剂盒、ELISA试剂盒、ELISA检测试剂盒
- 主营：ELISA、分光光度法、微量法、小鼠试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、ELISA试剂盒、大鼠试剂盒、人试剂盒、植物试剂盒、酶联免疫法、MEGAZYME、大鼠ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、植物ELISA 试剂盒、白介素试剂盒、细胞因子试剂盒、激素试剂盒、科研试剂盒、化学试剂、检测试剂盒、土壤试剂盒、土壤酶活性检测
- 主营：小鼠钙蛋白酶、elisa 试剂盒
- 主营：Elisa试剂盒、检测试剂盒、人elisa试剂盒、钙蛋白酶10、鼠elisa试剂盒、PCR检测试剂盒、生物试剂盒
- 主营：钙蛋白酶抑制蛋白、elisa试剂盒
- 主营：小鼠钙蛋白酶、检测试剂盒、elisa试剂盒
- 主营：小鼠钙蛋白酶1、试剂盒、信号调节激酶、人转谷氨酰胺酶
- 主营：scl-70igg、人1α羟、试剂盒、小鼠钙蛋白酶、葡聚糖、大鼠11β、16α羟基、1iga抗体、胶原c端、2-he2elisa、1igm抗体、25二羟基、17羟孕酮、dna糖苷酶、5α还原酶、研启生物、去氢血栓、人胰岛素、胶原n末端、大鼠8羟基、25羟基维生、2，5寡腺苷、大鼠25羟基、11脱氢血栓、羟基壬烯醛、三磷酸肌醇
- 主营：原代细胞、ELISA试剂盒、ELISA检测试剂盒、钙蛋白酶抑素试剂盒、重组蛋白、天然蛋白、活性蛋白、基础培养基、完全培养基、抗体、标记抗体、人检测试剂盒、大鼠检测试剂盒、标记细胞、永生化细胞
- 主营：大鼠白介素、表皮生长因子、ELISA试剂盒、小鼠脂联素、细胞因子、重组蛋白
- 主营：试剂盒、反应蛋白、细胞、钙蛋白酶、抗体、酶免试剂盒
- 主营：钙蛋白酶1试剂盒、elisa试剂盒、试剂盒、抗体
- 主营：小鼠钙蛋白酶、Elisa试剂盒、检测试剂盒