概述
Kemptide是一种人工合成的七肽(Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly),最初设计作为蛋白激酶A(PKA)的特异性底物。在实验室中,它被广泛用于激酶活性测定和药物筛选。 由于其序列中的Ser残基可以被PKA磷酸化,Kemptide成为研究PKA活性的理想工具。许多研究人员依赖它来评估激酶抑制剂的效力和特异性,尤其是在药物开发初期阶段。
物理化学性质
Kemptide的分子量为794.89 g/mol,通常以白色至类白色粉末形式提供。它在水中的溶解性良好,但建议使用PBS缓冲液或去离子水溶解,以确保稳定性。 作为一种短肽,Kemptide对pH和温度较为敏感。在酸性或碱性条件下可能发生降解,因此建议在中性pH(7.0-7.4)条件下使用。长期储存应避免反复冻融,以保持其活性。
主要用途
Kemptide主要用于蛋白激酶A(PKA)的活性测定。研究人员通常通过检测Ser残基的磷酸化水平来量化PKA的活性。这种方法在药物筛选中尤为常见。 此外,Kemptide还被用于酶动力学研究,如测定Km和Vmax值。它在信号转导研究和细胞通路分析中也有一席之地,特别是在涉及cAMP-PKA通路的研究中。
安全与储存
Kemptide的毒性较低,但仍需遵循实验室安全规范。避免直接接触皮肤和眼睛,操作时建议佩戴防护手套和眼镜。如不慎接触,应立即用大量清水冲洗。 储存条件至关重要。Kemptide应在-20°C干燥保存,避免反复冻融。溶解后的溶液建议分装保存,并在使用前检查是否有沉淀或浑浊现象。
B2B采购指南
采购Kemptide时,纯度是关键指标,通常要求≥95%。序列准确性也需验证,可通过质谱分析确认。溶解性是另一个重要因素,优质产品应能完全溶解于缓冲液中。 价格受纯度和供应商影响较大,常见规格为1mg或5mg包装。国际品牌如Sigma-Aldrich和Thermo Fisher提供高纯度产品,但价格较高;国内供应商如吉尔生化等性价比较高。建议索取COA(分析证书)以确保质量。
常见问题
Kemptide的溶解性如何?
Kemptide在水和PBS缓冲液中溶解性良好,建议使用去离子水或中性缓冲液溶解。溶解时可轻微涡旋或超声辅助,但避免过度加热。
如何检测Kemptide的磷酸化?
常用的方法包括放射性标记(32P-ATP)或非放射性检测(如ELISA或荧光标记)。具体选择取决于实验设备和灵敏度要求。
Kemptide的储存期限是多久?
未开封的干粉在-20°C下可保存1-2年。溶解后的溶液建议在-20°C分装保存,并在1个月内使用,避免反复冻融。
Kemptide能否用于其他激酶的检测?
Kemptide是PKA的特异性底物,对其他激酶的活性较低。如需检测其他激酶,建议选择相应的特异性底物。
Kemptide的推荐工作浓度是多少?
典型实验中的工作浓度为10-100μM,具体取决于检测方法和灵敏度要求。建议通过预实验优化浓度。
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