概述
萤火虫荧光素酶是一种来源于萤火虫（Photinus pyralis）的生物发光酶，在分子生物学和生物技术领域具有重要地位。研究人员发现，其催化荧光素氧化反应时发出的光信号强度与ATP浓度呈正比，这一特性使其成为细胞代谢研究的理想工具。 在报告基因分析中，荧光素酶基因常被用作报告基因，通过检测其表达水平来研究基因调控机制。相比其他报告基因如β-半乳糖苷酶，荧光素酶检测灵敏度更高，背景更低，检测时间更短。
物理化学性质
萤火虫荧光素酶分子量约61kDa，最适pH为7.8-8.0，需要Mg²⁺作为辅因子。其催化的发光反应最大发射波长约560nm，光强在反应开始后0.3-1秒达到峰值，随后迅速衰减。 该酶对温度敏感，25°C时活性最佳，高于37°C或低于4°C都会导致活性下降。冻干粉在-20°C下可稳定保存1-2年，但溶解后建议分装保存，避免反复冻融导致活性损失。
主要用途
报告基因分析是其主要应用，约占使用量的60%。研究人员将荧光素酶基因与目标基因启动子连接，通过检测发光强度反映基因表达水平。这种方法在药物筛选、基因治疗和基础研究中广泛应用。 另外30%用于ATP定量检测，基于ATP浓度与发光强度的线性关系，可快速检测细胞活性或微生物污染。剩余10%用于活体成像和生物标记，尤其在肿瘤研究和传染病检测中发挥重要作用。
安全与储存
虽然萤火虫荧光素酶本身毒性较低，但操作时仍需注意防护。冻干粉可能引起呼吸道刺激，建议在通风橱中操作。溶液接触皮肤或眼睛应立即用大量清水冲洗。 储存时，冻干粉应避光保存在-20°C，避免潮湿。溶解后的酶溶液建议分装保存，添加稳定剂如BSA或甘油可延长活性保持时间。运输通常采用干冰保温，确保全程低温。
B2B采购指南
采购时需明确活性单位定义（通常以光单位RLU/μg表示），高纯度产品活性可达1×10⁸ RLU/μg以上。建议选择提供COA（分析证书）和MSDS的供应商，确保批次间一致性。 价格受纯度、活性和包装规格影响，科研级产品约800-1500元/mg，诊断级可达2000元/mg以上。国际品牌如Promega、Sigma-Aldrich质量稳定但价格较高，国内供应商如碧云天、翊圣生物性价比更优。
常见问题
荧光素酶检测灵敏度如何？
灵敏度极高，可检测到10⁻¹⁸-10⁻²⁰ moles的酶分子，比传统ELISA高几个数量级。但信号衰减快，需使用化学发光仪即时检测。
如何选择荧光素底物？
D-荧光素钾盐是最常用底物，溶解性好，稳定性高。建议选购与酶匹配的专用底物，不同来源酶可能需优化底物浓度。
为什么检测结果不稳定？
可能原因包括：样本中含有荧光素酶抑制剂（如重金属）、ATP耗尽、pH偏离最佳范围或温度波动。建议设立阳性对照排查问题。
能否用于活体成像？
可以，但需使用表达荧光素酶的转基因动物或接种荧光素酶标记细胞。注射底物后通过活体成像系统检测发光信号，适用于肿瘤转移等研究。
与海肾荧光素酶有何区别？
萤火虫酶依赖ATP，发射黄绿光（560nm）；海肾酶不依赖ATP，发射蓝光（480nm）。双报告系统常同时使用两者以减少实验误差。
相关厂家
- 主营：培养箱、离心机、生物安全柜、实时荧光pcr 仪、赛默飞荧光定量PCR、伯乐荧光定量PCR仪、罗氏实时荧光量PCR、超低温冰箱、电转仪、电穿孔、二氧化碳培养箱、二手赛默飞培养箱、赛默飞分光光度计、赛默飞细胞计数仪、赛默飞超低温冰箱、赛默飞高速离心机、艾本德离心机、高速冷冻离心机、冷冻离心机、奥林巴斯显微镜、伯乐电穿孔仪、落地式离心机、赛默飞质谱仪、美谷分子酶标仪
- 主营：水质检测仪、bod测定仪、加油站设备、ATP荧光检测仪、恒温恒湿称重系统
- 主营：ELISA试剂盒、PCR试剂盒、科研试剂
- 主营：检测方、钠尿肽、试剂盒、同源物、ep300检测、结合蛋白、大鼠c-肽(、微球蛋白、抗胰蛋白酶、淋巴瘤因子、蛋白磷酸酶、死亡激动剂、核心域蛋白1、大鼠e选择素、大鼠janus激酶、激活蛋白激酶、大鼠ⅱ型胶原、大鼠ⅳ型胶原、大鼠klotho蛋白、细胞激活因子、大鼠ⅲ型胶原、大鼠nadh脱氢酶1、大鼠ⅵ型胶原α1、elisa 检测试剂盒
- 主营：ELISA试剂盒、PCR试剂盒、生化试剂盒、脂蛋白、关基因、亲环素、钾通道、列抗体、ntp溶液、蛋白酶、脑蛋白、病毒抗、蛋白质、239抗体、dtt溶液、科研试剂
- 主营：ELISA试剂盒、PCR试剂盒、生化试剂盒、蛋白、抗体、细胞
- 主营：抑制物、糖蛋白、试剂盒、释放因子、人色氨酰、炎性蛋白、刺激因子、生长因子、武装因子、钙黏蛋白、淋巴细胞、成孔蛋白、趋化因子、人促睡眠肽、免疫球蛋白、节苷脂抗体、人精氨酸酶、二聚化蛋白、人β葡糖苷酶、人β内酰胺酶、肝炎病毒抗体、活化黏附因子、凋亡抑制因子、人潜伏膜蛋白、人二氢嘧啶酶
- 主营：试剂盒、ELISA试剂盒、PCR试剂盒、科研细胞系
- 主营：试剂盒、葡萄糖脱氢酶、样本中过氧化氢、细胞水平脂肪酸、还原型谷胱甘肽
- 主营：罗丹明B酰肼、缺氧探针、鬼笔环肽、胆固醇荧光探针、深红溶酶体荧光探针、钙黄绿素红、钙螯合剂
- 主营：elisa试剂盒、生物试剂、抗体、荧光试剂盒、化学试剂、培养基、标准品、比色法试剂盒
- 主营：甘氨酸、胺原粉、呋虫胺、荧光素酶、辛硫磷、噻唑膦、甘宝素、酸原粉、乙磷铝、醇原粉、盐酸胍、嘧菌酯、盐原粉、脲原粉、甲霜灵、苯氧威、丁醚脲、灭草松、威原粉、茚虫威、诱导剂、乙烯利、吡虫啉、增甘膦、中间体、vc乙基醚
- 主营：胆酸、半叶素、二羟基吲哚、荧光素酶、缩合剂、生物缓冲液、表面活性剂、硅烷偶联剂、L-丙交酯、光电材料中间体、精细化工
- 主营：抗氧剂、氧化剂、紫外线吸收剂、荧光增白剂、催化剂、还原剂、缩合剂、光引发剂、酶制剂、成核剂、生物缓冲液、表面活性剂、检测试剂、光电材料中间体、改性剂、指示剂、多肽、染料中间体、固醇系列、酶溶液
- 主营：血管紧张素转化酶、乳酸氧化酶、脱氧核糖核酸酶1型、荧光素酶、乙酰胆碱酯酶、硫酸软骨素ABC酶、肝素酶