共提试剂盒
概述
共提试剂盒是分子生物学实验室的常规耗材，采用硅胶膜柱技术实现DNA和RNA的同时提取。在临床样本有限的情况下，这种一管双提的方案可以最大限度利用珍贵样本。许多实验室主管反馈，相比分步提取，共提方案可节省30-50%的时间和成本。 其核心技术在于裂解液中离液盐（如异硫氰酸胍）和pH值的精确调控，使硅胶膜能同时吸附两种核酸。目前主流品牌提取效率可达90%以上，DNA片段回收范围从100bp到50kb，RNA完整性指数（RIN）常保持在7以上。
物理化学性质
裂解液通常含4-6M离液盐、表面活性剂和还原剂，能有效破坏细胞膜和核膜，释放核酸同时抑制核酸酶活性。洗涤液含乙醇或异丙醇，用于去除蛋白质和盐分而不洗脱核酸。 硅胶膜在离液盐存在时通过氢键和静电作用吸附核酸，洗脱液（通常为TE缓冲液或水）通过破坏这些作用力释放核酸。优化后的配方可使DNA和RNA洗脱效率均达85%以上，A260/280比值在1.8-2.0之间。
主要用途
临床诊断是最大应用领域，特别适用于肿瘤基因检测、产前筛查等需要同时分析DNA突变和RNA表达的场合。约60%的NGS建库前处理使用共提方案。 基础研究中，病毒学研究常需同时提取宿主DNA和病毒RNA。法医学领域用于微量样本的STR分析和RNA标记检测。近年来在单细胞多组学研究中展现出独特优势，可从单个细胞中获取基因组和转录组信息。
安全与储存
裂解液含异硫氰酸胍等有毒物质，操作应在通风橱中进行，接触皮肤需立即用大量清水冲洗。使用过的耗材应浸泡在10%漂白液中至少30分钟后再丢弃。 未开封试剂盒通常可稳定保存1-2年，但开封后的裂解液建议3个月内用完。洗脱缓冲液易长菌，可分装后-20℃保存。硅胶柱需保持干燥，受潮后吸附效率会显著下降。
B2B采购指南
采购时首要关注提取效率（应提供不同样本类型的数据）、交叉污染率（建议≤0.1%）和操作时间（优质产品可在30分钟内完成）。通量需求大的实验室可考虑96孔板式自动化兼容型号。 价格受品牌、通量和原材料影响，进口品牌如Qiagen、Thermo Fisher价格通常是国产的2-3倍。建议先进行小批量测试，重点比较实际样本的提取效果而非标准品数据。大宗采购可争取15-30%的折扣。
常见问题
共提和分提哪个更好？
样本量充足且只需一种核酸时建议分提，纯度和得率更高。样本珍贵或需多组学分析时选共提，但要注意某些下游应用对共提核酸的兼容性。
如何提高微量样本提取效率？
可加入载体RNA（如鲑鱼精DNA）、减少洗涤体积、延长洗脱时间或使用低吸附耗材。某些试剂盒提供专门的微量样本优化方案，得率可提升20-30%。
提取的DNA和RNA能保存多久？
DNA在-20℃可稳定数月，4℃约1周；RNA更不稳定，建议提取后立即使用或加入RNA稳定剂，-80℃长期保存不宜超过6个月。
为什么洗脱液体积影响得率？
体积过小（<30μL）可能导致核酸未完全溶解，过大（>100μL）则稀释浓度。经验表明50μL通常是平衡点，第二次洗脱可再回收10-15%核酸。
不同样本类型如何处理？
血液样本需先裂解红细胞，组织样本需充分匀浆，培养细胞可直接裂解。特殊样本如FFPE、唾液等应选用专用试剂盒，处理方案差异很大。
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