概述
共提试剂盒是分子生物学实验室的常规耗材,采用硅胶膜柱技术实现DNA和RNA的同时提取。在临床样本有限的情况下,这种一管双提的方案可以最大限度利用珍贵样本。许多实验室主管反馈,相比分步提取,共提方案可节省30-50%的时间和成本。 其核心技术在于裂解液中离液盐(如异硫氰酸胍)和pH值的精确调控,使硅胶膜能同时吸附两种核酸。目前主流品牌提取效率可达90%以上,DNA片段回收范围从100bp到50kb,RNA完整性指数(RIN)常保持在7以上。
物理化学性质
裂解液通常含4-6M离液盐、表面活性剂和还原剂,能有效破坏细胞膜和核膜,释放核酸同时抑制核酸酶活性。洗涤液含乙醇或异丙醇,用于去除蛋白质和盐分而不洗脱核酸。 硅胶膜在离液盐存在时通过氢键和静电作用吸附核酸,洗脱液(通常为TE缓冲液或水)通过破坏这些作用力释放核酸。优化后的配方可使DNA和RNA洗脱效率均达85%以上,A260/280比值在1.8-2.0之间。
主要用途
临床诊断是最大应用领域,特别适用于肿瘤基因检测、产前筛查等需要同时分析DNA突变和RNA表达的场合。约60%的NGS建库前处理使用共提方案。 基础研究中,病毒学研究常需同时提取宿主DNA和病毒RNA。法医学领域用于微量样本的STR分析和RNA标记检测。近年来在单细胞多组学研究中展现出独特优势,可从单个细胞中获取基因组和转录组信息。
安全与储存
裂解液含异硫氰酸胍等有毒物质,操作应在通风橱中进行,接触皮肤需立即用大量清水冲洗。使用过的耗材应浸泡在10%漂白液中至少30分钟后再丢弃。 未开封试剂盒通常可稳定保存1-2年,但开封后的裂解液建议3个月内用完。洗脱缓冲液易长菌,可分装后-20℃保存。硅胶柱需保持干燥,受潮后吸附效率会显著下降。
B2B采购指南
采购时首要关注提取效率(应提供不同样本类型的数据)、交叉污染率(建议≤0.1%)和操作时间(优质产品可在30分钟内完成)。通量需求大的实验室可考虑96孔板式自动化兼容型号。 价格受品牌、通量和原材料影响,进口品牌如Qiagen、Thermo Fisher价格通常是国产的2-3倍。建议先进行小批量测试,重点比较实际样本的提取效果而非标准品数据。大宗采购可争取15-30%的折扣。
常见问题
共提和分提哪个更好?
样本量充足且只需一种核酸时建议分提,纯度和得率更高。样本珍贵或需多组学分析时选共提,但要注意某些下游应用对共提核酸的兼容性。
如何提高微量样本提取效率?
可加入载体RNA(如鲑鱼精DNA)、减少洗涤体积、延长洗脱时间或使用低吸附耗材。某些试剂盒提供专门的微量样本优化方案,得率可提升20-30%。
提取的DNA和RNA能保存多久?
DNA在-20℃可稳定数月,4℃约1周;RNA更不稳定,建议提取后立即使用或加入RNA稳定剂,-80℃长期保存不宜超过6个月。
为什么洗脱液体积影响得率?
体积过小(<30μL)可能导致核酸未完全溶解,过大(>100μL)则稀释浓度。经验表明50μL通常是平衡点,第二次洗脱可再回收10-15%核酸。
不同样本类型如何处理?
血液样本需先裂解红细胞,组织样本需充分匀浆,培养细胞可直接裂解。特殊样本如FFPE、唾液等应选用专用试剂盒,处理方案差异很大。
相关厂家
- 主营:实验细胞、微生物菌种、微生物质控品、试剂盒、标准物质
- 主营:水质检测仪、水质监测设备、水质分析仪器、试剂盒、浊度检测仪、色度检测仪、COD测定仪、悬浮物检测仪、二氧化氯检测仪、自来水常规九项检测仪、溶解氧测定仪、电导率测定仪、余氯测定仪、PH检测仪、水体叶绿素a检测仪、蓝绿藻检测仪、红外测油仪、滴定仪、水质重金属检测仪、COD氨氮总氯检测仪、氨氮检测仪、总磷检测仪、总氮测定仪、BOD测定仪、荧光法溶解氧检测仪、水质分析仪
- 主营:水质测定仪、浊度检测仪、色度检测仪、碱度检测试剂盒、COD测定仪、便携式水质测定仪、总氯检测仪、多参数水质分析仪、COD氨氮总磷总氮测定仪、悬浮物检测仪、二氧化氯检测仪、高锰酸盐指数检测仪、污水检测仪器、溶解氧测定仪、BOD测定仪、余氯测定仪、氨氮检测仪、总磷检测仪、总氮检测仪、水质叶绿素a检测仪、ph检测仪、蓝绿藻检测仪、红外测油仪、电导率检测仪、水质重金属检测仪、多参数水质检测仪
- 主营:试剂盒、POM
- 主营:致病微生物检测试剂、物种鉴定检测试剂、转基因检测试剂、试剂盒厂家、植物病害检测试剂
- 主营:试剂盒、elisa试剂盒、pcr试剂盒、细胞
- 主营:ELISA试剂盒、PCR试剂盒、科研试剂
- 主营:脂蛋白、关基因、亲环素、ELISA试剂盒、PCR试剂盒、生化试剂盒、钾通道、列抗体、ntp溶液、蛋白酶、脑蛋白、病毒抗、蛋白质、239抗体、dtt溶液、科研试剂
- 主营:科研试剂盒、酶免试剂盒、elisa试剂盒、进口ELISA试剂盒、PCR试剂盒、细胞、生物试剂、生化测试盒
- 主营:分析仪、监测仪、报警仪、检测试剂盒、吸气臂、回流管、无人船、测量仪、臭氧计、均质器、风速仪、均浆机、黑度仪、测定仪、传感器、计数器、采样器、传声器、风量罩、混匀仪、流量计、机器人、控制器、量率仪、测试仪、试验箱
- 主营:Pom美国杜邦、日本宝理pom、旭化成pom、试剂盒、Pom100p、Pom500p、Pom900p、M90-44、F20-03、ABS747、abs757、LCP、PA6T、PA9T、POE、PBT、PVDF、PETG、COC、HIPS、TPEE、TPU、TPV、日本旭化成pom、美国杜邦pom
- 主营:检测试剂盒厂家、隔离鞋套、医用防护服、医用隔离衣
- 主营:梅思安、多组分、复合气体、检测试剂盒、环境检测仪、粉尘采样器、气体探测器、甲醛检测仪、烟气分析仪、便携式流速、气体检测仪、红外测温仪、非甲烷总烃、油气回收检测仪
- 主营:程控定量封口机、97孔定量盘、酶底物法试剂、试剂盒、CST测试仪、醋酸铅纸带、润滑油检测仪、自动漩涡混合器、澄明度检测仪、细菌内毒素测定仪、防爆温湿度计、电线电缆长度测量仪、地毯平毛机、高压注脂枪、外夹式通球指示器、电阻率自动测定仪、深水温度计、暗箱式紫外分析仪、红外烘烤灯、颗粒强度仪、可控硅移相调节器、等强度粱实验装置、程控静态电阻应变仪、电测水位计、激光功率计、不锈钢贝勒管
- 主营:水质检测仪、高锰酸盐指数检测仪、cod检测仪、试剂盒、氨氮检测仪、总磷检测仪、总氮检测仪、浊度检测仪、悬浮物检测仪、溶解氧检测仪、电导率检测仪、PH检测仪、色度检测仪、TOC检测仪、BOD检测仪、红外测油仪、紫外多参数检测仪、水质重金属检测仪、水中油检测仪、TDS检测仪、溶解氧在线检测仪、PH在线检测仪、浊度在线检测仪、余氯在线检测仪、大肠杆菌检测仪、菌落总数检测仪
