概述
CY5-UTP(1mm)是一种荧光标记的尿苷三磷酸衍生物,广泛应用于分子生物学和核酸检测领域。在实验室日常使用中,研究人员会发现其荧光信号稳定且易于检测,是核酸标记实验的理想选择。 CY5是一种花菁类荧光染料,其激发和发射波长位于红色区域,能有效减少生物样本的自发荧光干扰。与UTP结合后,可通过酶促反应掺入RNA分子,用于多种分子生物学应用。这种化合物在科研和诊断领域具有重要地位,特别是在高通量测序和单细胞分析中。
物理化学性质
CY5-UTP(1mm)的最大激发波长约为649nm,发射波长约为670nm,适合大多数荧光检测系统的红色通道。其荧光量子产率高,信噪比优异,在实际应用中能提供清晰的检测信号。 该化合物在水溶液中稳定性良好,但在强光或高温条件下可能发生降解。pH值对其荧光强度有影响,最佳工作pH通常在7.0-8.5之间。冻干粉末形式在-20°C下可长期保存,而溶液形式建议分装后冷冻保存,避免反复冻融。
主要用途
CY5-UTP(1mm)主要用于RNA标记和检测。在荧光原位杂交(FISH)实验中,它能提供高对比度的信号,帮助研究人员精确定位特定RNA序列。 实时荧光定量PCR(qPCR)是另一个重要应用领域,CY5标记的探针能实现多重检测。此外,它还广泛应用于核酸测序、微阵列分析和单分子成像等技术中。在诊断领域,CY5-UTP可用于病原体检测和基因表达分析。
安全与储存
虽然CY5-UTP(1mm)毒性较低,但仍需遵守实验室安全规范。操作时应佩戴手套和防护眼镜,避免吸入粉尘或接触皮肤。如不慎接触,应立即用大量清水冲洗。 储存条件对保持化合物稳定性至关重要。冻干粉末应保存在-20°C避光环境中,溶解后的溶液建议分装成小份冷冻保存。运输过程中需使用干冰保持低温,并避免阳光直射。
B2B采购指南
采购CY5-UTP(1mm)时,首要关注的是纯度指标,优质产品的HPLC纯度应≥95%。荧光强度是另一个关键参数,不同批次间应保持一致性。 价格受纯度、包装规格和供应商影响较大。建议选择信誉良好的生物技术公司,如Thermo Fisher、Sigma-Aldrich等知名品牌,或国内优质的生物试剂供应商。大宗采购时可要求提供质检报告和试用装,以确保产品质量。
常见问题
CY5-UTP(1mm)与CY3-UTP有何区别?
主要区别在于荧光特性:CY5发射红光(约670nm),CY3发射橙光(约570nm)。CY5更适合与绿色荧光蛋白(GFP)或多色实验配合使用,且组织穿透性更好。
如何评估CY5-UTP(1mm)的质量?
可通过HPLC检测纯度,荧光分光光度计测定激发/发射光谱,以及实际应用测试信号强度和稳定性。优质产品应无明显杂质峰,荧光信号强且稳定。
溶解后的CY5-UTP(1mm)能保存多久?
溶解于适当缓冲液(pH7.0-8.5)后,分装保存于-20°C可稳定数月。但反复冻融会加速降解,建议分装为单次使用量。
CY5-UTP(1mm)适用于哪些酶促反应?
适用于T7、SP6等RNA聚合酶催化的体外转录反应,以及逆转录酶催化的cDNA合成反应。但不同酶的最适条件可能略有差异,建议参考具体protocol。
如何优化CY5-UTP(1mm)的标记效率?
可调整反应体系中CY5-UTP与普通UTP的比例(通常1:3至1:5),优化反应温度和时间,并确保酶活性充足。过高的CY5-UTP比例可能抑制酶活性。
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