概述
花青素5-四嗪(Cy5-Tetrazine)是一种结合了花青素荧光团和四嗪反应基团的有机化合物。在生物标记领域,这种化合物因其独特的荧光特性和高效的点击化学反应而备受青睐。 Cy5是一种常用的近红外荧光染料,发射波长在670nm左右,适合深层组织成像。四嗪基团则能够与反式环辛烯(TCO)发生快速的生物正交反应,这种反应在活细胞标记和体内成像中具有重要应用。
物理化学性质
Cy5-Tetrazine的最大吸收波长通常在650nm左右,发射波长在670nm附近,这使得它非常适合用于近红外荧光成像。在实际应用中,这种长波长荧光可以有效减少生物组织的自发荧光干扰。 四嗪基团的反应活性极高,与TCO的反应速率常数可达10^4 M^-1s^-1以上。这种快速反应特性使得Cy5-Tetrazine在活体标记和时间敏感的实验中有显著优势。
主要用途
Cy5-Tetrazine主要用于生物共轭化学和分子成像。在生物标记实验中,研究人员常将其与抗体、肽段或其他生物分子结合,用于细胞和组织的特异性标记。 在活体成像领域,Cy5-Tetrazine与TCO修饰的探针结合,可以实现高灵敏度的肿瘤标记和追踪。此外,它还被用于超分辨率显微镜技术和多色荧光标记实验。
安全与储存
Cy5-Tetrazine对光敏感,应避光保存。长期储存建议在-20°C条件下,使用前需恢复至室温并避免反复冻融。 虽然毒性较低,但仍需注意防护。操作时应佩戴手套和护目镜,避免吸入粉尘或接触皮肤。如不慎接触,立即用大量清水冲洗。
B2B采购指南
采购Cy5-Tetrazine时需关注纯度(HPLC纯度应≥95%)、荧光量子产率(通常≥0.3)和溶解性。不同批次的产物可能存在荧光性能差异,建议先小样测试。 市场价格因纯度和包装规格而异,1mg规格约500-1000元,10mg规格约3000-5000元。知名供应商包括Sigma-Aldrich、Lumiprobe和Click Chemistry Tools等。
常见问题
Cy5-Tetrazine与其他Cy染料有何区别?
Cy5-Tetrazine除了具有Cy5的荧光特性外,还带有四嗪反应基团,能够与TCO发生特异性点击化学反应,这是普通Cy5染料不具备的功能。
Cy5-Tetrazine的荧光稳定性如何?
在避光条件下稳定性较好,但长时间光照会导致荧光淬灭。建议实验时控制光照时间,并使用抗淬灭剂延长信号持续时间。
如何评估Cy5-Tetrazine的质量?
可通过HPLC检测纯度,紫外-可见分光光度计测定吸收光谱,荧光分光光度计测量发射光谱和量子产率来综合评估产品质量。
Cy5-Tetrazine适用于哪些成像系统?
适用于大多数配备近红外通道的荧光显微镜和活体成像系统,如IVIS、Odyssey等,需匹配650nm激发和670nm发射滤光片。
四嗪基团在生理条件下稳定吗?
四嗪在生理pH范围内相对稳定,但在强还原环境中可能被降解。实验设计时需考虑体系中的还原性物质影响。
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