概述
CY3-胱氨酸是一种重要的生物荧光标记试剂,属于花菁染料家族。在生物医学实验室中,它常被用来标记蛋白质、抗体或其他生物分子,以便于后续的荧光检测和成像。 这种染料的优势在于其出色的光稳定性和较高的荧光量子产率,使其成为长时间成像实验的理想选择。CY3的发射波长位于可见光谱的黄色区域,与常见的荧光显微镜滤光片系统兼容性良好。
物理化学性质
CY3-胱氨酸的最大激发波长约为550nm,发射波长约为570nm,具有较高的摩尔消光系数(约150,000 M-1cm-1)。其荧光量子产率通常在0.3-0.5之间,具体数值取决于溶剂和环境pH值。 在生理pH条件下(7.0-7.4),CY3-胱氨酸表现出良好的稳定性。其溶解度较高,既可溶于水,也可溶于DMSO、DMF等有机溶剂,这为不同实验条件下的标记提供了便利。
主要用途
CY3-胱氨酸最主要的应用是蛋白质和多肽的荧光标记。通过其活性基团与蛋白质中的氨基或巯基反应,可以实现共价连接。标记后的蛋白质可用于Western blot、免疫荧光染色等实验。 在细胞生物学研究中,CY3标记的抗体广泛用于流式细胞术和共聚焦显微镜成像。其发射波长与常见的绿色荧光蛋白(GFP)通道兼容,便于多色标记实验的设计和实施。
安全与储存
虽然CY3-胱氨酸的毒性较低,但仍建议在通风良好的环境下操作,避免吸入粉尘或接触皮肤。如不慎接触,立即用大量清水冲洗。 储存时应严格避光,最好保存在-20°C的干燥环境中。开封后建议分装保存,避免反复冻融。溶解后的溶液在4°C下可稳定保存约1周,长期保存建议置于-20°C。
B2B采购指南
采购CY3-胱氨酸时,纯度是关键指标,通常要求≥95%。同时应关注产品的荧光量子产率和标记效率,这些参数直接影响实验效果。 价格受纯度、包装规格和品牌影响较大。小包装(1-5mg)价格较高,约500-2000元/毫克;大包装(50-100mg)单价会显著降低。知名供应商如Thermo Fisher、Sigma-Aldrich的产品质量有保障,但价格相对较高。
常见问题
CY3-胱氨酸与CY5有什么区别?
CY3发射黄光(~570nm),CY5发射红光(~670nm)。CY3更适合与GFP配合使用,而CY5更适合与远红荧光蛋白配合。CY3的光稳定性通常优于CY5。
如何提高CY3-胱氨酸的标记效率?
优化反应pH(通常8.0-9.0最佳)、适当延长反应时间(2-4小时)、控制染料与蛋白质的摩尔比(5-10:1)。标记后建议使用脱盐柱去除游离染料。
CY3-胱氨酸标记的样品能保存多久?
标记好的样品在4°C避光条件下可保存1-2周,-20°C可保存数月,但建议尽快使用以获得最佳荧光信号。
CY3-胱氨酸适合体内成像吗?
CY3的组织穿透深度有限,更适合体外实验。如需体内成像,建议选择发射波长更长的染料如CY5或CY7。
如何避免CY3-胱氨酸的荧光淬灭?
避免长时间光照,加入抗淬灭剂如DABCO或商业抗淬灭封片剂,成像时使用适当的激光功率和曝光时间。
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