概述
1-4-二硫代赤藻糖醇(DTE)是生化实验室常用的还原剂,特别适用于蛋白质研究中的二硫键还原。在蛋白质电泳前处理中,实验室技术人员普遍认为DTE比β-巯基乙醇更有效且用量更少。 DTE于1964年首次合成,因其独特的结构能够形成分子内二硫键而具有强还原性。在蛋白质组学、结构生物学等领域,DTE是不可或缺的试剂,每年全球消耗量达数十吨。虽然稳定性较差,但其高效的还原能力使其仍被广泛使用。
物理化学性质
DTE分子量为154.25,含有两个硫醇基团,能够与二硫键形成稳定的六元环结构。这种结构特征使其还原能力是β-巯基乙醇的2-3倍,在蛋白质研究中使用浓度通常为5-50mM。 DTE的水溶液在pH7.0时的标准还原电位约为-0.33V,表明其具有较强的还原能力。但稳定性较差,在空气中易被氧化,尤其在碱性条件下氧化更快。溶液状态下的半衰期在pH8.0、25°C时约为4小时。
主要用途
在蛋白质电泳(如SDS-PAGE)中,DTE用于还原蛋白质中的二硫键,使蛋白质完全解聚。通常使用5-10mM浓度,在95°C加热5分钟即可完成还原。 蛋白质结晶学研究中,DTE用于维持蛋白质的还原状态,防止二硫键错误形成。此外,在蛋白质组学研究中,DTE用于酶解前的蛋白质还原步骤,提高酶解效率。在抗体工程领域,DTE用于抗体的还原和重链、轻链分离。
安全与储存
DTE具有中等毒性,LD50(大鼠经口)约为3g/kg。操作时应避免吸入粉尘,建议在通风橱中使用。皮肤接触可能引起刺激,应佩戴防护手套。 储存时应严格密封,置于2-8°C干燥环境中,避光保存。开瓶后应尽快使用,剩余试剂应用氮气保护。实验室级产品通常采用1g、5g小包装,工业级可能有25g、100g包装。过期或变黄的DTE应弃用,因为氧化产物可能干扰实验结果。
B2B采购指南
采购时需特别关注纯度(≥99%)、水分含量(≤0.5%)和还原当量(理论值为154.25)。优质产品应提供HPLC纯度证明和水分含量检测报告。 价格受纯度、包装规格和品牌影响较大。Sigma-Aldrich等进口品牌价格较高,约1000元/克;国产优质品牌价格约为500-800元/克。大批量采购(100g以上)可降至约300元/克。建议选择有稳定氮气保护包装的产品,避免购买有明显变黄的产品。
常见问题
DTE和DTT有什么区别?
DTE是1,4-二硫代赤藻糖醇,DTT是其立体异构体1,4-二硫代苏糖醇。两者还原能力相似,但DTT更稳定、更常用,价格也更高。在大多数应用中可互换使用。
如何判断DTE是否失效?
失效的DTE会变黄或产生明显硫醇气味减弱。可靠方法是测定还原能力:配制10mM溶液,加入少量Ellman试剂,黄色越深表示活性越高。
DTE溶液能保存多久?
新配制的DTE水溶液在4°C可保存1-2天,-20°C可保存1-2周。长期保存建议分装冻存,使用前避免反复冻融。加入EDTA可略微延长保存时间。
DTE可以替代β-巯基乙醇吗?
在大多数情况下可以,且用量更少(DTE通常用5-10mM,β-巯基乙醇需50-100mM)。但β-巯基乙醇更稳定,对某些特殊蛋白质可能效果更好。
DTE对人体有害吗?
DTE有中等毒性,应避免直接接触。操作时戴手套,在通风处使用。吞食有害,接触眼睛可能引起严重刺激。如接触皮肤,立即用大量水冲洗。
相关厂家
- 主营:甘氨酸、甘氨酰、苯硫醚、二硫代赤藻糖醇6892、阻燃剂、月桂胺、酸性橙、去铁酮、豆油酸、二苯胺、西瓜酮、八乙基、硫酸锆、磺化钯、二氰基、硫酸锶、硫酸锰、二苯胍、铝酸锶、聚合物、肌氨酸、四氢萘、磷酸铵、甲乙基、甲基亚、碳酸镁
- 主营:分析纯二硫代赤藻糖醇、分析纯试剂
- 主营:联吡啶、丁烯酸、阻燃剂、α-氨基、10-蒽二、3382-63-6、二苯胺、胶黏剂、氨基芴、二苯胍、十八酸、乙二酸、肉桂醇、王浆酸、异丁酮、溴化鏻、乙氧基、豆甾醇、碘乙烷、二乙醇、氟苯基、稀释剂、羟乙基、氯甲酚、桂皮醇
